在高密度蛙类养殖环境中,蛙类脑膜炎作为一种暴发快和死亡率高的疾病,严重影响我国蛙类养殖的发展。近些年,经过对蛙类脑膜炎病原菌的鉴定和人工感染试验,确定米尔伊丽莎白菌为蛙类脑膜炎的主要病原菌。同时米尔伊丽莎白菌还是一种含有多种耐药基因的细菌,因此滥用抗生素可能会引起细菌耐药性问题。柑橘精油是一种具有抗细菌,抗真菌,抗氧化能力的天然植物提取物,且不易产生细菌耐药性,因此具有作为潜在抗菌药物的开发价值。本研究通过分析柑橘精油的成分,针对其主要化学成分进行抗菌活性试验,并筛选出芳樟醇进行抗菌机理研究,主要研究结果如下:1.采用水蒸馏法进行柑橘精油的提取。通过气相色谱-质谱分析得出柑橘精油成分组成。其中7种化学物质成分含量大于1%,分别是柠檬烯（70.25%）,γ-松油烯（7.90%）,β-月桂烯（5.00%）,α-蒎烯（3.90%）,β-松油烯（1.71%）,α-松油醇（1.51%）和芳樟醇（1.03%）。2.药物敏感试验结果表明,米尔伊丽莎白菌芳对樟醇和γ-松油烯高度敏感,该菌对α-蒎烯和柠檬烯中度敏感和β-月桂烯对该菌低敏感。芳樟醇的抑菌直径最大,为42.37±0.36 mm。最小药物抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小药物杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）结果表明,芳樟醇、α-蒎烯、柠檬烯和γ-松油烯的MIC分别为0.1928 g/ml、0.0851 g/ml、0.6811 g/ml和0.6812 g/ml,MBC分别为0.3856 g/ml、0.0851 g/ml、2.7246 g/ml和1.3624 g/ml。3.通过抗菌动力学试验探究芳樟醇对米尔伊丽莎白菌生长的影响,结果表明芳樟醇浓度越高对细菌生长的抑制能力越强。通过细胞活性测定方法测定细菌细胞的存活率,当药物浓度越高,药物致死时间越短。当芳樟醇浓度为0.5×MIC时,为药物对米尔伊丽莎白菌的半数致死浓度。4.荧光显微镜和扫描电镜观察结果可得,米尔伊丽莎白菌细胞膜的保护功能被药物破坏,细胞物质运输紊乱。同时随着药物处理时间的增加,细菌细胞膜完整性破坏越严重。表明芳樟醇通过改变细胞膜的保护功能从而使细菌死亡。5.利用转录组学技术探讨芳樟醇对米尔伊丽莎白菌的抗菌机理,结果表明芳樟醇处理组与对照组的差异表达基因共有392个,其中304个基因表达下调,188个基因表达上调。米尔伊丽莎白菌对芳樟醇应答的表达基因的GO数据库分为三大类,分别为生物学过程8个,细胞成分2个,分子功能10个。其中细胞过程、新陈代谢、细胞结构、催化活性和结合具有代表性。共有93个变化基因被注释到32个KEGG通路中。KEGG通路中基因注释最多的是氨基酸代谢途径,除此之外被注释的代谢途径还包括能量代谢等。