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目的:观察“形神共养”干预模式对衰老小鼠空间记忆能力,海马区神经元及线粒体的影响,并探讨其发挥抗衰老作用的线粒体动力学机制。方法:取18月龄SPF级雌性C57BL/6小鼠48只,采用随机数字表法分为衰老对照组、衰老“形养”组、衰老“神养”组、衰老“形神共养”组,另取3月龄小鼠12只成为青年对照组,每组12只。青年对照组及衰老对照组小鼠进行标准环境饲养,不进行任何干预;衰老“形养”、“神养”、“形神共养”组进行相应的跑台训练、“神养”环境干预、跑台训练结合“神养”环境干预,每周5次,持续8周。采用Morris水迷宫测试各组小鼠空间记忆能力,尼氏染色观察海马CA1区神经元损伤情况,透射电镜观察海马CA1区神经元线粒体形态变化,Western Blot法检测海马线粒体动力学相关蛋白Mfn2、OPA1、Drp1的表达。结果:1.各组小鼠Morris水迷宫测试结果:(1)在为期4天的定位巡航实验中,各组小鼠的逃避潜伏期总体呈下降趋势。第1天,与衰老对照组比较,衰老“神养”、“形神共养”组逃避潜伏期缩短(P<0.05);第2天,与衰老对照组比较,其余各组逃避潜伏期缩短(P<0.05);第3天,与衰老对照组比较,青年对照组、衰老“形神共养”组逃避潜伏期进一步缩短(P<0.05);第4天,与衰老对照组比较,其余各组逃避潜伏期进一步缩短(P<0.05);4天中,其余各组比较,未见显著性差异。(2)撤掉站台后,与青年对照组比较,衰老对照组第三象限停留时间百分比降低(P<0.05);与衰老对照组比较,各干预组第三象限停留时间百分比升高(P<0.05);与衰老“形养”、“神养”组比较,衰老“形神共养”组第三象限停留时间百分比进一步升高(P<0.05)。2.各组小鼠海马CA1区尼氏染色结果:青年对照组海马CA1区神经细胞形态正常,核仁清晰,结构完整,尼氏体大且数量多,胞体呈斑驳的蓝紫色染色,呈清晰、淡染的虎斑状;衰老对照组海马CA1区神经细胞数量减少,细胞结构破坏明显,正常神经细胞少见,胞体萎缩,尼氏体数量明显减少,溶解现象明显,成空泡样改变,染色变浅,形态结构模糊不清;衰老“形养”、“神养”组海马CA1区神经细胞数量减少、结构模糊、分布不均、排列稀疏,但神经细胞形态正常;衰老“形神共养”组神经细胞数量较多、结构较清晰、分布均匀、排列整齐,神经细胞形态正常,核仁清晰,结构完整。3.各组小鼠海马CA1区神经元线粒体透射电镜观察结果:青年对照组海马CA1区神经元线粒体状态良好,脊完整,无破损;衰老对照组海马CA1区神经细胞状态较差,大部分细胞破损,大部分线粒体破损严重,内容物流失,脊断裂;衰老“形养”、“神养”组海马CA1区部分神经细胞的线粒体内容物流失、溶解,少量线粒体出现浓染现象;衰老“形神共养”组海马CA1区大部分神经细胞的线粒体状态良好,脊完整,少量细胞内的线粒体出现膜破损现象。4.各组小鼠海马Mfn2、OPA1、Drp1蛋白表达:与青年对照组比较,衰老对照组Mfn2、OPA1蛋白表达下降(P<0.05),Drp1蛋白表达升高(P<0.05),各干预组Mfn2、OPA1蛋白表达升高(P<0.05),Drp1蛋白表达下降(P<0.05);与衰老对照组比较,各干预组Mfn2、OPA1蛋白表达升高(P<0.05),Drp1蛋白表达下降(P<0.05);与衰老“形养”、“神养”组比较,衰老“形神共养”组Mfn2、OPA1蛋白表达升高(P<0.05),Drp1蛋白表达下降(P<0.05)。结论:1.“形神共养”干预模式可有效提高衰老小鼠的空间记忆能力,减轻海马CA1区神经元损伤,改善神经元线粒体形态结构,发挥一定抗衰老作用,优于单一的“形养”、“神养”干预。2.“形神共养”干预模式抗衰老作用的产生可能是通过其可上调Mfn2、OPA1蛋白表达,下调Drp1蛋白表达,从而促进衰老小鼠海马区神经元线粒体的融合,抑制分裂来实现的。