中药核桃青皮提取物对食管癌细胞增殖的抑制作用及其分子机制的探讨

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目的恶性肿瘤已成为危害人类健康的严重疾病之一,食管癌是全球第九大恶性疾病,在世界许多地区流行,特别是在发展中国家,治疗以手术为主,但复发转移率较高,化疗效果也不甚理想,因此抗癌药物的研究对象逐渐转向高效、低毒的天然植物。中药抗肿瘤研究已显示巨大的潜力,尤其是开发植物中药中抗癌有效组分,分析中药化学结构和提取分离其有效成分是当前的探索方向。有研究表明,核桃青皮提取物可抑制体外培养的肿瘤细胞的增殖,其机理是直接杀伤肿瘤细胞。本研究观察了核桃青皮粗提取物和核桃青皮提取物没食子酸、乙酸乙酯、紫杉叶素、7-D-芹菜糖-儿茶酚对食管癌细胞增殖和CyclinD1蛋白表达的影响,从而为进一步开发治疗食管癌的中药提取物提供理论基础和实验依据。方法采用MTT法分别测定核桃青皮粗提物和核桃青皮提取物没食子酸、乙酸乙酯、紫杉叶素、7-D-芹菜糖-儿茶酚对食管癌细胞EC9706和KYSE150的增殖抑制率,并用Western Blot检测不同药物处理后食管癌细胞中细胞周期相关蛋白CyclinD1的蛋白表达。结果1、食管癌细胞KYSE150和EC9706的抑制增殖作用:核桃青皮粗提物和核桃青皮提取物没食子酸、乙酸乙酯、紫杉叶素、7-D-芹菜糖-儿茶酚浓度分别为10、20、40、80、160μg/mL时,核桃青皮粗提物和4种提取物中的没食子酸和乙酸乙酯对EC9706和KYSE150细胞均有抑制作用,其核桃青皮粗提物和核桃青皮提取物没食子酸、乙酸乙酯分别对KYSE150和EC9706细胞的抑制增殖作用与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2、Western Blot法检测发现食管癌细胞KYSE150和EC9706分别经三种药物(核桃青皮粗提物,核桃青皮提取物没食子酸和乙酸乙酯)处理后CyclinDl蛋白均显著降低。结论核桃青皮粗提物和核桃青皮提取物没食子酸和乙酸乙酯作为中药核桃青皮的中药成分,对食管癌细胞KYSE150和EC9706均有较强的抑制增殖作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞有关。
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