石油的环境污染问题日益突出,但长期以来尚无有效治理方法。尽管微生物修复技术被公认为是治理石油污染的较好方法,但是原位、高效、稳定、适应性强的石油降解菌株仍是生物治理技术中的软肋,急需有原创性的突破。　　 本文通过改变富集培养基的组分对原油中菌种进行富集,利用16SrDNA全序列分析及生物系统发育树对石油降解菌进行初步鉴定;用原油作唯一碳源,对富集的菌种进行原油降解实验,筛选出高效降解菌;向原油污染土壤添加不同量的菌液,将其放在室外,进行环境模拟实验,通过环境模拟实验,研究菌种的稳定性。　　 实验结果表明:(1)无机盐培养基中牛肉膏或马铃薯液体培养液的含量对菌种的富集培养具有一定的影响,60%的牛肉膏或马铃薯液体培养液+40%的无机盐培养液的富集培养基富集得到的菌种最多。(2)真菌和细菌相比,真菌的降解效果更好,尤其是Z11和Z18的降解效果最好,高达69%:细菌中X9和X15的降解率最高,可以达到64%以上;经鉴定X9属于芽孢杆菌属,X15属于枯草芽孢杆菌属。(3)用异辛烷富集原油中的生物量,然后用试剂盒提取DNA,对提取的DNA进行了Ta克隆,经过平板培养,对菌落数进行计数,得到54个菌落,这一结果与第2章中实验室培养得到的菌落数(33个菌落)相比,多出21个菌落。(4)环境模拟实验结果表明,对饱和烃和非烃降解效率最高的菌种是X15,降解效率分别可以达到23.21%;对沥青质降解效果最好的菌种是Z18,其降解率高达94.5%。(5)环境模拟试验前后添加菌种没有变化,说明原位筛选得到的菌种在环境模拟实验中的稳定性很好。