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恶性胶质瘤是最为常见的原发性脑瘤，因其具有极强的浸润和扩散能力，常用的医疗手段很难将其治愈，近年来研究发现间充质干细胞（marrow mesenchymalstem cells, MSCs）具有自我更新和趋向胶质瘤迁移的能力，成为治疗此类疾病的种子细胞。为了达到理想的治疗效果，必须保证移植的MSCs能够定向迁移到病灶或受损部位，因此研究调控MSCs定向迁移的机制成为热点之一。大量文献报道多种细胞因子（PDGF、IGF、EGF和Ang-1等）和信号通路（PI3K/Akt、MAPK/ERK1/2、JAK/STAT、Rho和TGF-β/Smad等）参与调控MSCs的定向迁移，在hMSCs中Wnt3a能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进细胞的迁移，而在小鼠肝细胞中HGF也能通过c-met上调细胞核内β-catenin的累积促进细胞趋化性迁移，目前关于HGF和Wnt/β-catenin信号通路协同调控MSCs迁移的作用鲜有报道。本文旨在研究β-catenin在HGF诱导MSCs趋化性迁移的过程中的作用。本研究采用Percoll密度梯度离心法从大鼠骨髓中成功分离、培养并扩增得到高纯度的MSCs。提取MSCs的总RNA，RT-PCR克隆得到SD大鼠β-catenin及其激活型ΔN90的cDNA，利用AdEasyTM系统构建重组腺病毒载体Ad-β-catenin和Ad-ΔN90，构建成功的重组腺病毒在QBI-293A细胞中包装并扩增，获得高滴度的病毒子，感染细胞以获得高表达β-catenin的MSCs。同时针对SD大鼠β-catenin基因由Abgent公司设计并合成FAM荧光标记的siRNA（FAM-siRNA），用脂质体转染MSCs降低β-catenin的表达。为进一步检测β-catenin在MSCs定向迁移过程中的作用提供有利的工具。首先研究β-catenin对MSCs迁移的影响，利用Boyden chamber研究发现β-catenin的抑制剂FH535上调β-catenin的磷酸化使其降解，显著性的抑制MSCs的迁移。β-catenin激活剂LiCl通过上调β-catenin促进的MSCs迁移呈浓度依赖效应，当LiCl浓度为10mM时，MSCs达到最大的迁移数量，而50ng/ml的Wnt3a也能促进MSCs的迁移。Duun chamber和划痕实验也证实了这些结果。免疫荧光染色结果显示LiCl和Wnt3a能够促进β-catenin的入核，而FH535能够抑制此种效应。以上说明β-catenin参与调控MSCs的迁移。在探讨β-catenin调控MSCs趋向HGF定向迁移的实验中，Boyden chamber和Dunn chamber装置研究发现FH535和低表达β-catenin（si-β-catenin）抑制MSCs趋向HGF的定向迁移，而LiCl、Wnt3a和过表达β-catenin都能够促进MSCs的迁移并增强HGF对MSCs的趋化效应。Western blot发现HGF能促进β-catenin和ABC蛋白水平的增加并抑制其磷酸化，同时HGF促进了β-catenin的入核，而FH535能抑制这种效应。说明β-catenin参与调控MSCs趋向HGF的定向迁移。综上，β-catenin能被LiCl和Wnt3a上调，从而促进MSCs迁移，而FH535促使β-catenin降解，抑制LiCl和Wnt3a对MSCs迁移的作用。β-catenin的上调也能够促进HGF诱导的MSCs定向迁移，而抑制β-catenin的表达则降低了MSCs向HGF定向迁移的能力。本研究为进一步揭示MSCs的定向迁移机制与临床应用MSCs进行移植提供了理论基础。