脱水胁迫导致的植物细胞质外体和细胞微环境的改变

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植物的生命过程经常要受到各种环境胁迫导致的脱水胁迫的影响。脱水胁迫导致植物细胞质外体和细胞微环境的改变,这种改变会对植物细胞的生理过程产生各种次生作用。这种改变目前很少受到人们的关注,可能主要是由于受到研究手段的限制。本研究对比了各种研究植物细胞质外体和细胞微环境的离子变化的测定方法,参考压力槽挤压法和灌注淋洗法并加以改进,进行了一种加压灌流法抽提叶片质外体溶质的方法的探索,并应用这一方法对脱水胁迫导致的植物细胞质外体和细胞微环境的改变进行了初步的分析研究。这种抽提方法是利用压力室模拟产生人工根压,连续反复3次将蒸馏水压入植物细胞间隙,然后通过与测定植物组织水势相同的方法反向加压将压入细胞间隙的蒸馏水压出,从而将细胞间隙溶液中的溶解物质冲洗出来,接下来进一步分析洗出液的物质成分和含量。实验表明,加压灌流法抽提叶片质外体溶质的方法能较好地抽提植物细胞间隙的可溶性物质,同时又避免引起细胞的伤害导致细胞内容物流出,这种方法克服了通过真空渗入后造成的植物细胞缺氧伤害,也避免了高速离心植物组织造成的机械伤害和细胞内含物的泄露对叶片质外体溶液的干扰和混杂对叶片质外体溶质的影响,使所得到的细胞外溶质具有较高的纯度,为未来进一步分析细胞外溶液中的酶或其它有代表性的质外体具生物活性物质的分析奠定了基础。通过对脱水胁迫导致的植物细胞质外体和细胞微环境的改变进行的分析表明,连翘(Forsythia suspense (Thunb.) Vahl)和冬青卫矛(Euonymus japonicus Thunb.)在受到不同程度脱水胁迫时,叶片细胞随着脱水胁迫强度的加大细胞离子的外渗的累计量也在不断加大,但细胞内离子外渗的速度在不同的区间内并无显著的改变,即细胞膜的透性在所测范围内没有明显的改变。这一结果和传统认为的植物在受到各种环境胁迫时细胞膜透性增大的理论有很大的不同,即传统理论认为的在脱水胁迫条件下植物细胞膜透性的增加只是所测定细胞间隙溶出液电导率的增加,它反映的是离子外渗的量随胁迫的不断进行造成的累积性增加而不是细胞膜的透性的增加。虽然脱水胁迫同时造成了叶片质外体和共质体溶液中钠、钾离子浓度的增加,但质外体比共质体溶液中钠、钾离子浓度的增加更高,导致了细胞内外离子浓度梯度的改变和离子平衡膜电位的改变。这也说明,连续不断的脱水胁迫造成细胞微环境的明显改变,使细胞内外的离子梯度变小甚至梯度逆转,导致包括细胞内外离子平衡的膜电位的改变和逆转,细胞膜电位的去极化。这些改变有可能引起细胞的次生生理改变并有可能与植物的抗性有关。
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