去卵巢大鼠结膜及泪腺炎症因子表达的研究

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第一部分去卵巢大鼠模型的建立和眼表评估目的:建立去卵巢大鼠模型,观察性激素水平改变对大鼠眼表的影响。方法:健康雌性SD大鼠20只随机分为两组,实验组(n=10)摘除大鼠双侧卵巢,对照组(n=10)为未摘除卵巢的模拟手术组。摘除卵巢后3m时,放射免疫分析法分别检测两组大鼠血清雌二醇、睾酮含量。术前及术后第1m、2m、3m、时两组均行SchirmerI检查、角膜荧光素钠染色检查进行眼表评估。结果:实验组大鼠去卵巢后第3m时,体内雌二醇浓度低于对照组(t=-35.37,P<0.05),睾酮浓度低于对照组(t=-12.13,P<0.05)。实验组大鼠术后第lm、第2m、第3m眼表Schirmer I检查未见泪液分泌减少、角膜荧光素钠染色与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论:大鼠去卵巢后第3m时体内雌二醇、睾酮水平下降;大鼠去卵巢后观察至第3m未见明显临床眼表损害。第二部分去卵巢大鼠结膜炎症因子的表达目的:观察IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子在去卵巢大鼠结膜中的表达。方法:健康雌性SD大鼠20只随机分为两组,实验组(n=10)摘除大鼠双侧卵巢,对照组(n=10)为未摘除卵巢的模拟手术组。于第3m时处死各组大鼠。取大鼠上方睑裂遮盖区之球结膜组织,HE染色观察结膜上皮细胞形态,免疫组化染色法、Western blot法检测实验组和对照组结膜IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达。结果:术后第3m时结膜HE染色见实验组结膜较对照组结膜上皮细胞层数增多,细胞排列紊乱,有角化趋势。免疫组织化学法检测结膜各炎症因子表达量实验组均高于对照组(A值:IL-17A:t=8.22,P<0.01、IL-1β:t=16.43, P<0.01、IL-6:t=13.44,P<0.01、 TNF-α:t=16.26,P<0.01)。Western blot法检测结膜各炎症因子表达量实验组均高于对照组(A值:IL-17A:t=19.41,P<0.01、IL-1β:t=12.63,P<0.01、IL-6:t=17.17,P<0.01、 TNF-α:t=15.19,P<0.01)。结论:大鼠去卵巢后结膜可出现组织学改变,IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达增加。第三部分去卵巢大鼠泪腺炎症因子的表达目的:观察IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子在去卵巢大鼠泪腺中的表达。方法:健康雌性SD大鼠20只随机分为两组,实验组(n=10)摘除大鼠双侧卵巢,对照组(n=10)为未摘除卵巢的模拟手术组。于第3m时处死各组大鼠。取大鼠眶外泪腺组织,HE染色观察泪腺腺泡细胞形态学变化,免疫组化法和Western blot法检测实验组和对照组泪腺IL-17A、IL-1βIL-6、TNF-α的表达。结果:泪腺HE染色见实验组泪腺腺泡萎缩,细胞大小不一、细胞内酶原颗粒明显减少,细胞排列紊乱。免疫组织化学法检测泪腺各炎症因子表达量实验组均高于对照组(A值:IL-17A:t=11.71,P<0.01、IL-1β:t=15.02,P<0.01、IL-6:t=25.59,P<0.01、 TNF-α:t=14.44,P<0.01)。Western blot法检测泪腺各炎症因子表达量实验组均高于对照组(A值:IL-17A:t=25.82,P<0.01、IL-1β:t=25.87,P<0.01、IL-6:t=22.95,P<0.01TNF-α:t=20.90,P<0.01)。结论:大鼠去卵巢后泪腺可出现组织学改变,IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达增加。
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