CpG ODN是含有非甲基化胞嘧啶—鸟嘌呤二核苷酸的单链脱氧寡核苷酸,通过与TLR9结合,能刺激人及哺乳动物的天然免疫系统,诱导产生以Th1型为主的免疫应答。CpG ODN作为人用疫苗佐剂在临床实验中取得了可喜的成果,作为动物疫苗佐剂的研究较少,这是因为CpG ODN具有种属特异性,即对一种动物表现生物活性的CpG ODN,在另一种动物则未必表现出同样的或同样强度的生物学活性。实验证明以CpG为核心的六核苷酸即CpG基序是导致种属特异性的原因。为了获得对牛或犬有免疫刺激作用的CpG ODN,以作为动物疫苗新型佐剂,我们根据CpG基序设计了60多条含有各种CpG基序的CpG ODN,经过体外筛选,获得了对犬免疫细胞有刺激活性的YW07、YW08和YW09；将YW07与含有铝佐剂的狂犬灭活疫苗联用免疫小鼠及犬,YW07能显著提高抗体产生水平及持续时间,并偏向Th1型免疫应答,且完全保护小鼠抵抗狂犬病毒的攻击。同时,获得了对牛免疫细胞有刺激活性的RW12,将RW12与含有206油佐剂的口蹄疫重组蛋白A7疫苗联用免疫小鼠及牛,RW12能显著提高其在动物体内的抗体水平及持续时间,一次免疫84天后进行攻毒实验,A7+206油+RW12组的牛80%(4／5)得到保护,灭活疫苗组只有50%(2／4)的牛得到保护。综上所述,我们开发的牛、犬特异性CpG ODN有望成为动物疫苗的新型高效佐剂。