信号转导和转录激活因子6(STAT6)属于分类的DNA结合蛋白家族,是一种广谱转录调节因子,具有一些保守的结构域,例如N-末端结构域,卷曲螺旋结构域,DNA结合结构域和SH2结构域。在哺乳动物中,病毒、生长因子、细胞因子和IFN-α都可激活STAT6。磷酸化的STAT6发生同源二聚化然后移位至细胞核,将信号从受体复合物传递到细胞核以调节相关基因的转录和表达进而参与正常的细胞反应。近年来,有研究表明STAT6不但在免疫系统的调节过程中起重要作用,而且还参与细胞增殖和细胞凋亡等活动。STAT6通过调节免疫相关基因和各种细胞凋亡功能基因来参与细胞免疫应答和细胞凋亡。STAT6调节各种免疫细胞、趋化因子CCL2、CCL20和CCL26的转录和表达,负责免疫细胞归巢,参与细胞炎症反应。另一方面,STAT6通过上调各种抗凋亡基因的表达来抑制细胞凋亡。例如,IL-4的抗细胞凋亡活性是通过激活STAT6和随后Bcl-xl的转录表达来介导。相反,STAT6沉默诱导凋亡相关基因Bax的表达并抑制抗凋亡基因Bcl-xl的表达。简而言之,STAT6具有多种生物学功能。STAT6的结构,表达和基于酪氨酸的磷酸化从鱼到哺乳动物都是保守的。然而,除了关于斑马鱼的零星文献外,鱼类STAT6的功能的相关文献鲜有发表。为了研究草鱼STAT6在先天免疫信号通路中的的激活机制和潜在功能,我们首先克隆鉴定了草鱼STAT6基因的全长cDNA序列为2747bp,开放阅读框(ORF)为2313bp,编码770个氨基酸的多肽。系统发育树分析显示,草鱼STAT6与鲤鱼STAT6具有最大的同源性。其次模拟RNA病毒在poly I:C的刺激下,提取细胞和各组织RNA,Q-PCR检测STAT6的表达量显著上调。最后通过免疫共沉淀和免疫荧光共定位实验检测,经过poly I:C刺激,草鱼STAT6能发生同源二聚化,而在没有经过poly I:C刺激的细胞中,草鱼STAT6不能发生同源二聚化。在草鱼细胞系中,过表达STAT6,Q-PCR检测CCL20和Bcl-xl的表达量上调;敲降STAT6,Q-PCR检测CCL20和Bcl-xl的表达量下调。在草鱼细胞系中转染的草鱼STAT6可以激活CCL20和Bcl-xl的启动子活性主要是通过DBD结构域而不是SH2结构域。过表达草鱼STAT6时可以增强细胞存活率,抑制细胞凋亡,而当敲降草鱼STAT6时,结果与之相反。综合来看,草鱼STAT6在先天免疫和抗凋亡中起着重要的作用。