蛇足石杉中石杉型三萜类成分研究

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蛇足石杉(Huperzia serrate(Thunb.) Trev.),又名千层塔,为石松目石杉科石杉属植物,为多年生阴生蕨类植物。以往学者对蛇足石杉的研究主要集中在生物碱类成分,如从中获得的石杉碱甲,具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,已在临床用于治疗老年性痴呆。除生物碱外,蛇足石杉中还有大量的非生物碱类成分,特别是结构较为独特的C环为七元环的石杉型三萜类成分。目前对该类成分的研究还较少,特别是该类型三萜类成分的作用有何特点,是否具有传统三萜类成分的活性还有待研究,因此本文中我们对蛇足石杉中石杉型三萜类化合物进行了成分富集并初步测试其中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)抑制活性和细胞自噬活性。  采用正相硅胶、反相硅胶、SephadexLH-20等柱色谱,本课题对蛇足石杉去生物碱类浸膏进行分离。并通过核磁共振、质谱等谱学数据进行化合物的鉴定,分离得到且鉴定出12个化合物,这些化合物分别为16-羰基-28β-甲基-3α,21α,30β-千层塔烯三醇(3α,21α,30β-trihydroxyserrat-28β-methyl-14-en-16-one,1)、千层塔烯二醇-21β-对二氢香豆酸酯(3β-hydroxyserrat-14-en-21β-yl-p-dihydrocoumarate,2)、千层塔烯二醇-3β,21α-二乙酸酯(seratenediol-3β,21α-diacetate,3)、千层塔烯二醇-3-乙酸酯(seratenediol-3-acetate,4)、21-表千层塔烯二醇-3-乙酸酯(21-epi-serratenediol-3-acetate,5)、3α,21β,24-千层塔烯三醇(3α,21β,24-trihydroxyserrat-14-en,6)、21-表-千层塔烯二醇(21-epi-serratenediol,7)、千层塔烯二醇(serratenediol,8)、16-羰基-3α,21β-千层塔烯二醇(3α,21β-dihydroxy-serrat-14-en-16-one,9)、3β,21β,24-千层塔烯三醇(3β,21β,24-trihydroxyserrat-14-en,10)、16-羰基-3α,21β,24-千层塔烯三醇(3α,21β,24-trihydroxyserrat-14-en-16-one,11)、1-羟基二苯并呋喃醇(1-dibenzofuranol,12)。所分离的化合物中1-11均为石杉型三萜类化合物,12为二苯并呋喃醇类化合物;化合物1、2为新化合物,且化合物1的D/E环为顺式稠合,与一般石杉型三萜类化合物的D/E环构型不同;化合物3和12首次从该植物中分离得到,并首次报道了化合物3的碳谱数据。  课题组前期研究中发现,熊果酸等三萜类化合物具有较好的HNE抑制活性,为此,我们对分离得到石杉型三萜类化合物进行了HNE抑制活性的初步探究。初筛结果发现化合物3和化合物6具有一定的HNE抑制活性,IC50分别是57.44μM和21.22μM,但明显低于齐墩果烷型三萜类化合物,提示C环的7元环结构可能是影响活性的因素之一。此外,在细胞自噬活性的研究中,发现化合物6和化合物10具有明显的细胞自噬诱导作用。
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