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目的:酒精滥用已经成为目前非常普遍的医学和社会问题。慢性酒精中毒可以严重损害中枢神经系统的正常功能,引起学习记忆方面的认知功能障碍,其中最具代表性的就是Wernicke–Korsakoff综合征。酒精中毒对中枢神经系统的影响目前尚不完全清楚,可能是通过调节不同的神经传导通路,影响不同的神经递质释放来实现的。目前对学习记忆功能的研究多集中于海马,海马是与记忆密切相关的结构,参与短时记忆向长时记忆的转化过程,也是对酒精敏感的结构之一。临床解剖学上的研究表明,嗜酒者行为功能受损与其大脑海马结构萎缩相关。同样,动物实验也已经证实,大鼠慢性酒精暴露可以引起海马神经元变性、萎缩、细胞凋亡,这种萎缩可以影响海马正常神经元突触的建立而产生记忆缺陷。经过长期抗氧化剂治疗后可以修复受损的神经元,重新建立神经元突触的可塑性,起到脑保护的作用,从而改善大鼠的学习记忆功能。在关于保护大脑神经元的研究中,脑源性神经营养因子(Brain-Derived Neurotrophic Factor, BDNF)已经受到越来越多的关注。酒精诱导的成人大脑神经退行性变以及酒精相关的神经发育障碍的研究中显示神经营养因子活性下降。现有大量实验证实,BDNF可以保护神经元免受酒精诱导的体外细胞死亡。BDNF基因编码的多态性及其受体TrkB与情感障碍、物质滥用、进食障碍有关,因此在酒精中毒的发病机制中发挥重要作用。有证据表明,BDNF参与调节生长发育、进食,促进突触可塑性的建立,可以用于神经退行性变疾病以及物质成瘾的潜在性治疗。最近的研究发现:丙戊酸钠还具有神经保护作用及营养神经的疗效。经动物实验证实,长期应用丙戊酸钠可以提高大鼠海马内的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)活性水平,CREB是一种转录因子,能够调控多种与长时记忆有关蛋白的合成,在被激酶磷酸化后成为有活性的转录因子(ρ-CREB),ρ-CREB可调节多种细胞因子的转录水平,其中包括在神经元突触的可塑性调节中发挥着重要作用的BDNF。那么丙戊酸钠是否能改善慢性酒精中毒大鼠的学习记忆功能,其机制是否与BDNF的水平有关,目前此方面的研究较少。本实验旨在观察慢性酒精中毒大鼠海马内BDNF水平的改变与酒精所致学习记忆损害是否相关,并探讨丙戊酸钠改善学习记忆功能的作用机制。方法:实验一:通过Morris水迷宫和Y迷宫实验筛选出成绩无显著性差异的雄性SD大鼠(体重180 g±20 g)28只,随机分为乙醇组和对照组,每组14只大鼠。乙醇组每天上午9:00给予酒精灌胃,共持续8周。对照组给予同等体积的生理盐水灌胃。在酒精戒断24 h后,每组随机挑选出7只大鼠进行体重测量、柳田知司评分及行为学测试(包括Morris水迷宫及Y迷宫测试),其余的7只大鼠取海马组织用于western blotting检测海马内BDNF蛋白水平。大鼠慢性酒中毒模型:以不同浓度的酒精灌胃,灌胃量为10 ml/kg/d,初始浓度为5%(V/V),第2、3周乙醇浓度分别为10%(V/V)、20%(V/V),自第4周起维持35%(V/V)的浓度(乙醇摄入量为3.5g/kg/d),总时程为8周。实验二:同样的方法挑选雄性SD大鼠56只,将其随机分成四组,每组14只,分别为:①乙醇+丙戊酸钠组(EtOH+VPA);②乙醇+生理盐水组(EtOH+Vehicle);③生理盐水+丙戊酸钠组(NS+VPA);④生理盐水+生理盐水组(NS+Vehicle)。四组大鼠分别给予乙醇或者生理盐水灌胃8周。各组大鼠于第5周开始每天上午8:30分别腹腔内注射丙戊酸钠(200 mg/kg)或生理盐水(剂量1 ml/kg),注药30 min后接受与实验一相同的灌胃处理。酒精戒断24 h后,每组随机挑选7只大鼠进行体重测量、柳田知司评分及行为学测试,其余的7只大鼠取海马组织用于western blotting检测海马内BDNF蛋白水平。结果:乙醇组大鼠体重与对照组相比较无显著性差异(P>0.05)。柳田知司评分结果显示,乙醇组大鼠的戒断症状评分明显高于对照组(P<0.01)。行为学的水迷宫实验表明,乙醇组大鼠较对照组平台潜伏期延长(P<0.05),原平台所在象限内的空间探索次数、时间百分比显著下降(P<0.05),大鼠的空间记忆明显受损;Y迷宫实验表明,与对照组相比较,酒精组大鼠第一天、第二天的错误次数明显增加(P<0.05),总反应时间未见明显差异(P>0.05);与第一天学习成绩相比较,对照组大鼠第二天的错误次数明显下降(P<0.01),而乙醇组大鼠两天的错误次数无明显差异(P>0.05)。大鼠海马组织的western blot检测结果提示,乙醇组大鼠的海马BDNF的平均光密度值较对照组显著下降(P<0.05)。在丙戊酸钠的药物试验中:各组大鼠体重未见显著性差异(P>0.05)。EtOH+VPA组的柳田知司总评分较EtOH+Vehicle组明显下降(P<0.01),与NS+VPA组和NS+Vehicle组差异无显著性(P>0.05)。行为学结果与EtOH+Vehicle组相比较,EtOH+VPA组大鼠均有明显的改善,western blot检测结果提示海马BDNF的平均光密度值亦显著提高(P<0.01)。结论:1慢性酒精暴露可以导致大鼠学习记忆功能受损,海马BDNF表达降低可能是学习记忆受损的机制之一。2丙戊酸钠可以改善慢性酒精中毒诱导的大鼠学习记忆受损,其作用机制可能与提高海马BDNF表达水平有关。