原发性高血压(Essential Hypertension,ESH)是一种常见的多基因、多因素慢性疾病,传统药物治疗难以令人满意,而基因治疗则具有诱人的临床应用前景。针对高血压发病的不同机制,选择不同的调控基因进行治疗,将可能达到长期控制和治疗高血压的目的。大量研究表明,心房利钠肽(ANP)参与了高血压发生和发展,导入ANP基因不仅能有效降低大鼠血压,而且可减轻高血压的终末器官损害,因此成为高血压基因治疗最佳侯选基因之一。本研究所采用质粒载体pcDNA3.1+含有巨细胞病毒的CMV启动子,其转录活性最高,并含有来自牛生长激素基因的PolyA序列,可以较好地保证转录后mRNA在体内的稳定性,国内尚无应用此质粒携带hANP基因进行高血压转基因研究的报道。本项研究首先成功钓取hANP cDNA并构建了重组质粒pcDNA3.1+ /hANP,进而通过直接骨骼肌注射法及尾静脉注射法导入SHR进行转基因治疗。结果表明,重组质粒pcDNA3.1+/hANP可在SHR骨骼肌内有效表达hANP的mRNA及其前体蛋白,并可进入血循环引起血浆ANP水平的升高,进而有效降低大鼠的血压,同时可对SHR的饮水量、尿量产生短期影响,而对其心率、体重、进食无显著影响。组织病理及形态学检查结果表明,肌注途径转基因方法在有效降低大鼠血压的同时,还有效地逆转了高血压所致的终末脏器(如心、肾)损害。本研究还观察了一些与pcDNA3.1+/hANP基因治疗安全性相关的一些主要生理、生化指标的改变,并检测了SHR对表达hANP蛋白后是否存在免疫反应。结果表明,采用裸质粒经静脉及肌注途径导入SHR后,对SHR的体温、体重、心率、进食量没有影响;各组大鼠亦未观察到呕吐、腹泻、活动减少或躁动等可能与治疗相关的异常症状;与基因治疗相关的五个生化指标组间比较未见异常;转基因后在各实验组大鼠体内也未检测到抗hANP抗体的存在,说明通过pcDNA3.1+质粒载体携带目的基因hANP通过肌肉注射或静脉注射途径导入SHR体内是一种较为安全的转基因治疗手段。