论文部分内容阅读
近年来,由于持续遗传改良和饲料营养等研究的不断进步,白羽肉鸡的生产性能不断提高,但同时也存在肉品质下降和体脂过多沉积等诸多问题。与此同时,随着经济的快速发展和劳动力成本日益增加,国内出现了夏、秋绿茶的大量过剩,再加上绿茶加工过程中产生的碎茶,数量非常庞大。2005年以来,本实验室以蛋鸡为实验对象,在验证绿茶粉、绿茶多酚及EGCG降低动物脂肪过度沉积、提高鸡肉品质的功效方面做了很多基础工作,基本上确定绿茶及多酚在家禽类动物上应用的量效关系。在此背景下,本论文开展了茶多酚对生长发育中后期白羽肉鸡脂肪代谢影响的研究,并进一步探究了茶多酚调控肉鸡脂肪代谢的分子机制,为绿茶(尤其是夏、秋绿茶)在家禽类动物上的饲料化应用提供确切的理论依据,同时丰富了茶多酚降脂减肥机制研究的理论体系。本论文主要研究结果如下:1茶多酚显著降低了肉鸡的血脂和体脂水平选取72只发育中期的肉仔鸡(28日龄,脂肪快速沉积期)为研究对象,分别灌喂0、80、160mg/(kg.d)等不同剂量的茶多酚,试验周期为28天。结果表明,4周试验处理显著降低了肉鸡血清甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的浓度,而显著提高了动物血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和游离脂肪酸(FAA)的含量。同时,茶多酚也显著降低了动物的腹脂率、皮下脂肪厚度、肌间脂肪宽度及肝脏、胸肌、腿肌等组织脂肪含量。而在试验第2周取样时,各处理组动物血脂和体脂指标与对照组相比均无显著性差异。动物组织脂肪酸组成分析可知,茶多酚干预显著降低了处理组肉鸡肝脏和腿肌中单不饱和脂肪酸的比例,提高了多不饱和脂肪酸的比率。而且,试验组肉鸡肝脏脂肪酸组成与对照组相比在试验处理2周后即出现显著变化,但腿肌脂肪酸组成则直至4周取样时才出现相应的变化。因此,在肉鸡生长发育中期开始添加茶多酚能够显著降低动物血脂和体脂水平,提高鸡肉多不饱和脂肪酸的比率,增强动物肉品的营养价值。2茶多酚显著改变肉鸡脂肪代谢相关基因的表达和关键酶的活性为了阐明茶多酚降脂功效的分子机制,本试验利用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测了茶多酚处理对动物肝脏、腹脂、腿肌和胸肌中脂肪代谢相关基因表达的影响,同时分析了各处理组肉鸡肝脏脂肪合成和氧化分解关键酶活性的变化。试验结果表明,与对照组动物相比,茶多酚显著抑制肉鸡肝脏脂肪合成相关基因(FAS、ACC、SCD1、SREBP-1c等)的表达,降低脂肪合成关键酶(FAS、ACC)的活性;同时促进处理组动物肝脏、脂肪、肌肉组织中脂肪分解、利用关键基因(ATGL、CPT1、ACOX、LPL、PPARa)的表达,提高脂肪酸β氧化限速酶(CPT1)的活性。与动物血脂和体脂等指标不同,茶多酚灌喂2周后,处理组肉鸡组织脂肪代谢关键基因的表达量已出现显著变化,符合动物营养调控规律,即先出现功能基因表达量的变化,然后才出现该基因对应表型指标的改变。本研究结果表明茶多酚缓解肉鸡脂肪过度沉积的机制在于其能够显著降低肝脏脂肪的合成及向肝外组织分泌,并增强肝脏、脂肪和肌肉组织中脂肪的分解利用。在肝脏、腹脂和肌肉三种组织中,肝脏脂肪代谢相关基因对茶多酚干预的响应最为显著,充分说明肝脏是茶多酚调控肉鸡脂肪代谢的主要靶器官。3茶多酚显著提高肉鸡肝脏AMPK/ACC通路关键蛋白磷酸化水平肝脏在家禽类动物脂肪代谢中处于中心地位,该器官同时又是茶多酚调控的主要靶器官。鉴于茶多酚调控肉鸡脂肪代谢深层次的分子机制仍不十分清楚,本论文开展了茶多酚对肉鸡肝脏AMPK/ACC通路影响的研究。结果显示,2周茶多酚处理显著提高肉鸡血清瘦素(Leptin)浓度,增强肝脏AMPK和ACC蛋白磷酸化水平,同时显著升高肝脏AMPK酶活水平,降低肝脏ACC特异底物丙二酰辅酶A的浓度。本研究结果表明,茶多酚能够显著提高肉鸡血清瘦素浓度,激活AMPK/ACC通路,增加动物脂肪酸氧化,降低脂肪合成。本研究中,茶多酚同时极显著降低了肝脏SCD1基因的表达,而相关文献报道SCD1与瘦素、AMPK存在紧密的调控关系。因此,我们可以推测茶多酚可能通过或部分通过Leptin-SCD1-AMPK-ACC-CPT1途径调控肉鸡脂肪代谢,实现其降低家禽类动物脂肪过度沉积功效的。