消肿止痛合剂对大鼠皮瓣成活率影响的实验研究与网络药理学分析

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woyaoqian115
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目的:皮瓣移植术后皮瓣坏死是皮瓣移植过程中较为常见的恶性并发症。中药能够从多方面、多环节入手,对于提高皮瓣成活率有着重要的研究价值和重大的临床意义,消肿止痛合剂作为骨伤科常用中药制剂,在临床应用多年,疗效显著,具有活血消肿止痛作用,与防治皮瓣坏死的作用机制存在相关性。本研究首先通过动物实验研究消肿止痛合剂对皮瓣成活率的影响,然后应用网络药理学进行作用机制分析,并结合分子对接技术验证分析结果,探究消肿止痛合剂影响皮瓣成活率的分子机制,为临床提高皮瓣成活率提供新的治疗思路。方法:第一部分将30只SD大鼠按照随机数字表法平均分为三组:假手术组、模型组、中药组,分别在给药1天,3天,5天,7天统计皮瓣成活率,给药1周后透明硫酸纸描绘皮瓣成活情况并采集皮瓣远端组织标本应用HE染色技术进行组织病理形态观察。第二部分通过TCMSP在线数据库分析平台获取消肿止痛合剂的潜在活性成分与作用靶点,利用Gene Cards、TTD、OMIM、GAD数据库检索与皮瓣相关靶点,将上述二者共有的靶点输入STRING数据库,分析得出PPI网络;应用Cytoscape 3.2.1软件中Cyto NCA插件筛选潜在核心靶点,并构建“成分-核心靶点-疾病”网络;对关键节点进行基因本体(GO)和通路富集(KEGG)分析;最后应用分子对接技术初步验证分析结果的可靠性。结果:皮瓣成活率统计结果显示,中药组成活率明显高于模型组,中药组皮瓣坏死面积明显小于模型组,HE染色结果发现,中药组大鼠皮瓣组织间隙中炎症细胞浸润明显减少,组织水肿明显减轻。网络药理学分析结果显示消肿止痛合剂影响皮瓣成活率的主要活性成分有:木犀草素、山奈酚、豆甾醇、柚皮素、槲皮素。消肿止痛合剂影响皮瓣成活率的关键靶基因主要包括PTGS2、PPARG、IL1B、AKT1、CXCL8、EGFR、TP53、SERPINE1、MMP2、MMP9、JUN、HMOX1、MAPK1、CASP3、CYCS。GO功能富集分析发现消肿止痛合剂影响皮瓣成活率主要与氧化应激反应、细胞对化学与氧化应激的反应等相关。KEGG通路富集分析发现消肿止痛合剂影响皮瓣成活率主要与脂质、动脉粥样硬化与流体剪应力等相关。分子对接结果显示15个关键靶点与5个主要有效成分均具有较高的亲和力,与关键活性成分木犀草素、柚皮素、槲皮素、豆甾醇、山奈酚亲和力最高的5个关键靶点分别为:CYCS、MMP9、MMP2、CYCS、PTGS2。结论:消肿止痛合剂可明显提高皮瓣成活率,减少皮瓣坏死面积,可能从炎症反应、氧化应激反应和细胞对化学应激反应等方面,通过多成分、多靶点、多途径的作用方式提高皮瓣成活率,为后续进一步深入研究和临床推广提供理论参考。
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