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前言 多态性是指以两种表型(大抵至少两种基因型)存在于某一人群中的一种孟德尔性状或单基因性状。这两种表型(或基因型)在人群中很常见，即它们在人群中出现的频率不低于1％-2％。基因多态在本质上是染色体DNA中核苷酸排列顺序的差异性。基因多态性决定了个体之间存在差异。近年来，基因多态与疾病遗传易感性的关系，特别是一些功能基因多态与肿瘤的关系日益受到人们的重视。目前已发现许多基因都与胃癌的发病有关，例如最近EI-Omar等人报道IL-1基因多态与胃癌的遗传易感相关。Shibata等人研究L-myc RFLP在胃癌中的分布时发现，L-myc RFLP在胃癌患者和正常健康日本人中的分布是不同的，无论是按基因型计算还是按等位基因出现的频率计算这种差别都依然存在。Ushijima T等人在做动物实验时也发现小鼠的某些基因型对致癌物敏感，参与了致癌物的致癌过程。 人类胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体，包括两组在生化和免疫方面都相区别的同工酶：胃蛋白酶原A(pepsinogen A，PGA)和胃蛋白酶原C(pepsinogen C，PGC)。PGA是胃蛋白酶A(pepsin A)的前体；PGC，也被称为前胃泌素，是胃蛋白酶C(pepsin C)的前体。胃蛋白酶原C广泛分布于胃及近端十二指肠，是一种内切蛋白酶，属于天冬氨酸蛋白酶家族。人类胃蛋白酶原C最初出现于胚胎后期，约胚胎的第32-36周，是消化功能逐渐成熟的一种标志。胃粘膜产生的胃蛋白酶原有99％分泌至胃腔，仅有1％分泌人血，血清水平在一定程度上可以反映其分泌状态。 胃蛋白酶原C基因位于6p21.1-pter，共有9个外显子和8个内含子，全长10.7kb。胃蛋白酶原C有两个电泳同工酶，在蛋白质水平上没有发现遗传学变化。然而，在基因水平上，应用多种限制性内切酶分析发现，在其第7－8内含子内存在100hp的插人一缺失限制性片段长度多态（restrict加驷eni kn吵POworpMsin，RF u）片段。日本学者地。a T等人在研究胃蛋白酶原C基因7－8内含于100hp的插人一缺失多态时发现携有短片段者患胃体溃疡的机率是携有同源长片段者的7．12倍，说明胃蛋白酶原C基因的 RF’LP是胃体溃疡的遗传易感性的一个有用指标。Ohtde Y等人的研究也证实了胃蛋白酶原C基因多态与胃体溃疡有关系。目前不仅在日本人和高家索人的基因中发现胃蛋白酶原C基因的7－8内含子内的100hp的插入一缺失多态片段，而且在中国人的基因中也发现胃蛋白酶原C基因的7—8内含子内存在多态片段。这种多态片段可以用Son出em杂交和聚合酶链反应（polylnerase chain reachon，PCR）等方法方便地检出。 为了探讨遗传因素与胃癌的关系，即胃癌的遗传易感性问题，我们选择了胃蛋白酶原C基因作为研究的标志基因。在研究初期，我们将重点放在胃蛋白酶原C基因多态是否与胃癌有相关性这一问题，因此，首先选择了胃癌患者和健康的正常人作为研究对象。研究的目的是通过检测胃蛋白酶原C基因多态在两组中的分布，了解胃蛋白酶原C基因多态在两组的分布上是否存在差别。在得到胃蛋白酶原C基因多态在胃癌患者组和正常健康对照组之间的分布存在差别这一肯定结果的基础上，我们又在辽宁庄河胃癌高发区选择了胃癌家系组和正常健康对照组作为研究对象，进一步探询胃蛋白酶原C基因多态与胃癌的关系及庄河地区胃癌高发的遗传因素。 研究发现血清胃蛋白酶原C的浓度与胃的功能状态有联系，如溃疡病患者的血清胃蛋白酶原C浓度要高于正常人，并且当患者的血清胃蛋白酶原 C浓度大于或等于 30p牙1时，患者患胃溃疡的机率是患十二指肠溃疡的3倍。血清胃蛋白酶原A与血清胃蛋白酶原 的比值小于等于3时，对萎缩性胃炎有诊断意义。胃蛋白酶原C基因多态与血清胃蛋白酶原水平的关系如何，胃蛋白酶原C基因多态是否影响血清胃蛋白酶原水平，这是我们第三步要研究的课题。在研究了PGC基因多态和血清PG的关系之后，我们很想了解一下各种胃病理改变时PGC在胃粘膜中的表达情况，所以第四部分的工作是通过对石蜡包埋的胃粘膜活检标本进行PGC免疫组化染色，观察PGC在正常胃粘膜，胃癌前病变及胃癌组织中的表达情况。 ·2· 实验材料 本实验共检测了 362例外周血 DNA的 PGC基因多态及 186例血清胃蛋白酶原浓度。其中＊ 例来自沈阳地区，包括73例胃癌患者外周血，42例健康人外周血，分别采自中国医科大学第一临床学院肿瘤科和中国医科大学第一临床学院血库；247例来自辽宁庄河胃癌高发区，其中包括186例健康人外周血，61例胃癌家系成员外周血，包括七个不同家系，每个家系均包括祖孙三代人，其中至少有两人罹患胃癌。枯6例健康人血清标本来自辽宁庄河胃癌高发区。 实验方法 分另通过常规方法和DNA提取试剂盒提取全血DNA；采用PCR技术对362例标本的胃蛋白酶原C基因的7－8内含子的一段特定区域进行扩增，检测胃蛋白酶原C基因多态；采用IRMA方法检测血清胃蛋白酶原的浓度。采用免疫组织化学法检测胃粘膜中胃蛋白酶