全氟化碳对冲击波致肺Ⅱ型上皮细胞损伤的作用及机制探讨

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目的:冲击伤是指由直接或间接接触爆炸而引起的复杂创伤,其中以肺冲击伤最具有代表性,病情较重,死亡率较高,目前尚无特效的治疗办法。全氟化碳液体通气能显著提高急性肺损伤患者的血氧饱和度、肺顺应性、通气血流比值,减轻肺部炎症反应。本研究选取人肺Ⅱ型上皮细胞系A549细胞为研究对象,采用冲击波致肺Ⅱ型上皮细胞损伤模拟肺冲击伤体外模型,研究全氟化碳对冲击波致肺Ⅱ型上皮细胞损伤的作用及其机制,为临床肺冲击伤的治疗提供理论依据。方法:1.应用100Kpa冲击波致A549细胞损伤,细胞分为空白对照组(C),冲击伤组(B),观察细胞生物学、细胞形态学及炎性因子mRNA的变化。2.用PFC干预冲击波致肺Ⅱ型上皮细胞损伤,细胞分为空白对照组(C),冲击伤组(B),冲击伤+全氟化碳组(B+P),全氟化碳组(P),观察各组细胞的细胞生物学、细胞形态学、细胞炎性因子、氧化应激因子的变化。3.应用Western blot法检测细胞磷酸化MAPK、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量及NF-κB活化水平并应用LncRNA基因芯片高通量研究。结果:1.与对照组相比,冲击伤组A549细胞明显稀疏、形态变差,细胞核固缩;与对照组相比,冲击伤组细胞增殖与迁移均受抑制,炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA显著升高。2.PFC干预能改善冲击波对A549细胞增殖与迁移的抑制作用;PFC可以下调冲击波引起的炎性因子与氧化应激因子的升高,并能够减少冲击波引起的细胞凋亡。3.与对照组相比,冲击伤组细胞磷酸化MAPK、Bax、Cleaved Caspase-3、NF-κB蛋白表达量明显升高,Bcl-2蛋白表达量下降。与冲击伤组相比,冲击伤+全氟化碳组的磷酸化MAPK、Bax、Cleaved Caspase-3、NF-κB蛋白表达量显著下降,Bcl-2蛋白表达量升高。结论:1.PFC对冲击波致A549细胞损伤具有保护作用。2.PFC可以通过下调MAPK和NF-κB信号通路,减轻炎症与氧化应激反应。3.PFC可以下调Bax、Caspase-3、上调Bcl-2减少细胞凋亡。
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