重庆市油菜菌核病发生规律及菌核病菌多样性研究

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核盘菌引起的油菜菌核病是油菜生产上最重要的病害之一,在我国长江流域和西南地区造成严重危害。本文对重庆市油菜菌核病发生规律进行调查,并选取90个来自重庆市9个不同地区的油菜菌核病菌株,对其生物学特性、菌丝亲和群、遗传多样性以及致病力方面展开研究,旨在明确重庆市油菜菌核病发生规律以及菌核病菌群体遗传分化情况,为本地油菜菌核病的综合防治提供理论依据。结果如下:1.通过对重庆市璧山区八塘镇所选取的两种前茬作物不同的类型田进行油菜菌核病发生规律调查,结果显示玉米前茬田的子囊盘数量、主茎病叶率、茎秆发病率以及病情指数均远高于红薯前茬田。玉米前茬田子囊盘始现于2月中旬,在3月初达到高峰后,于3月中旬再次达到高峰,累计子囊盘数量为112.4个/m~2;叶部发病始现于3月初,在3月下旬达到高峰,高峰期主茎病叶率为44.93%;茎秆发病始现于3月下旬,在4月下旬达到高峰,高峰期茎秆发病率为34%,病情指数为18。红薯前茬田子囊盘始现于2月下旬,在3月初达到高峰,累计子囊盘数量为12.2个/m~2;叶部发病始现于3月中旬,在3月下旬达到高峰,高峰期主茎病叶率为2.42%;茎秆发病始现于4月初,在4月下旬达到高峰,高峰期茎秆发病率为6%,病情指数为1.5。相关性分析结果表明,一周平均温度与主茎病叶率、茎秆发病率和病情指数有显著相关性,而一周降雨天数和相对湿度则与子囊盘数量、主茎病叶率、茎秆发病率和病情指数均无显著相关性。2.从重庆市9个不同地区的油菜菌核病病株上收集分离纯化鉴定得到90个油菜菌核病菌株。选取77个菌株进行生物学特性测定,结果显示不同菌株在菌落形态、生长速度、菌核数量等方面存在显著差异。在菌落形态上,根据菌丝质地可将菌株分为菌丝质地丰富和质地稀疏两个类型,而根据菌核分布情况可将菌株分为围绕培养皿边缘、散乱排布于平板中和环绕中心形成1-3个菌核带三种类型;菌株菌丝生长速度范围在3.4~52.4 mm/d之间;菌核数量范围在3.3-27个/皿之间;77个菌株的菌丝生长速度与菌核数量无显著相关性。从90个油菜菌核病菌株中筛选出34个菌株进行离体茎秆致病力测定,选取供试品种为中油821。测定结果显示,病斑直径大小范围在7.2~40.2 mm之间,菌株之间存在明显的致病力差异。菌株致病力与菌丝生长速度、菌核数量之间无相关性。3.对90个油菜菌核病菌株进行菌丝亲和群测定,结果表明90个菌株被划分为47个菌丝亲和群,其中有13个菌丝亲和群包含了两个以上的菌株,剩下的34个菌丝亲和群仅包含一株与自身亲和的菌株。菌丝亲和群与菌株地理来源有一定的相关性,但与菌株的生长速度以及菌核产量无相关性。4.利用9对SSR引物对90个油菜菌核病菌株进行遗传多样性分析。排除有一对无多态性的引物(42-4)后,剩下的8对SSR引物共扩增出24条带。90个菌株中共检测到52个单倍型,有少数单倍型频率较高,且单倍型与菌丝亲和群之间无相关性。9个群体的基因多样性指数范围在0.1570~0.4700之间。根据Nei’s遗传距离构建UPGMA聚类进化树、STRUCTURE群体遗传结构分析以及遗传分化和基因流的结果发现,渝西5个群体与渝东2个群体之间的遗传组成明显不同;连锁不平衡分析表明,9个群体的菌株以无性繁殖为主;AMOVA分析结果表明,9个群体间的遗传变异主要来源于群体内的菌株之间;遗传距离与地理距离相关性分析显示,两者之间存在一定相关性。
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