【摘 要】
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畜牧业作为新疆的支柱性产业之一,在整个社会发展中具有重要地位。线虫作为蠕虫的一种,在整个寄生虫种群中占据很大比例。家畜感染线虫病后会引起腹泻、呕吐、营养不良,使家畜饲料利用率低,造成严重的经济损失,急性病例可导致家畜死亡。对于家畜线虫病的治疗通常采用药物治疗,使用驱虫药初期可以达到良好的效果,但长期使用会产生耐药性以及药物残留问题。为了更有效控制线虫对家畜、人体、环境及经济造成的影响,国内外对土壤
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区高层次人才天池计划项目“捕食性真菌新疆分离株遗传特性及真菌生物冻干制剂的临床应用研究”课题主持人:张伟副教授(新疆农业大学); 新疆维吾尔自治区百名青年博士引进计划项目“新疆地区捕食性真菌的分离及遗传特性研究”课题主持人:张伟副教授(新疆农业大学);
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畜牧业作为新疆的支柱性产业之一,在整个社会发展中具有重要地位。线虫作为蠕虫的一种,在整个寄生虫种群中占据很大比例。家畜感染线虫病后会引起腹泻、呕吐、营养不良,使家畜饲料利用率低,造成严重的经济损失,急性病例可导致家畜死亡。对于家畜线虫病的治疗通常采用药物治疗,使用驱虫药初期可以达到良好的效果,但长期使用会产生耐药性以及药物残留问题。为了更有效控制线虫对家畜、人体、环境及经济造成的影响,国内外对土壤中自然存在的具有捕食效力的真菌—捕食性真菌进行研究并运用于驱虫。在利用捕食性真菌进行线虫防治过程中,受不同地区地理环境差异影响,各地区均有自己独特的优势菌种,因此在利用捕食性真菌时,需要分离出适应本地生存的候选菌株,以便提高线虫捕食效率。本研究采集新疆乌鲁木齐市南山牧场以及新疆农业大学校园内土壤,采用土壤撒布法,以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为诱饵线虫,分离出3株具有捕食线虫活性的真菌,通过形态以及分子生物学鉴定种属后,利用光学显微镜对3株真菌捕食线虫过程进行详细观察,最后利用CMA培养基对3株捕食性真菌的捕食效率进行测定,研究结果为新疆地区动物线虫病生物防治工作提供了理论依据。主要研究结果如下:(1)本试验共采集土壤30份,分离出3株捕食性真菌,根据形态学研究显示分离的菌株1分生孢子呈圆锥形,分生孢子长29.8μm~36.2μm,分隔位于分生孢子的2/3处。菌株2分生孢子呈饱满的梨形,分生孢子长16.2μm~24.5μm,分隔位于分生孢子基部。菌株3分生孢子呈椭圆形,分生孢子长15.1μm~20.5μm,部分分生孢子无隔,分隔位于分生孢子1/2处。通过形态学初步鉴定3株捕食性真菌均属于节丛孢属。对分离出捕食性真菌进行ITS2基因PCR扩增,序列比对及系统进化分析显示,3株捕食性真菌分别为圆锥节丛孢菌(Arthrobotrys conoides),少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)以及多孢节丛孢菌(Arthrobotrys superba)。(2)对3株捕食性真菌的捕食过程进行观察研究发现,3株捕食性真菌均以黏性菌网的方式捕食,在捕食后期均可产生厚壁孢子。但在捕食线虫的过程中生长速度不同,捕捉线虫的时间不同,且厚壁孢子产生的时间与生长方式也存在差异。最后,在实验室条件下利用3株捕食性真菌菌株进行捕食线虫活力测定,结果发现3株捕食性真菌菌株在CMA培养基中对驴消化道线虫三期幼虫的捕食率分别为97.47%、92.17%、96.52%。本研究通过形态学以及分子生物学的方法鉴定出3株捕食性真菌分别为圆锥节丛孢菌、少孢节丛孢菌、多孢节丛孢菌。并对3株菌捕食线虫的过程进行的详细的描述,总结了3株捕食性真菌在捕食过程中的异同。最后,在实验室条件下,测定圆锥节丛孢菌、少孢节丛孢、多孢节丛孢菌3株捕食性真菌对驴消化道线虫第三期幼虫的捕食率分别为97.47%、92.17%、96.52%。三株真菌均表现出良好的捕食效果,可为今后新疆地区捕食性真菌的临床应用奠定基础。
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