【摘 要】
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目的:通过检测维生素D(Vitamin D,VitD)对妊娠糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)小鼠胎盘组织中蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(Protein Tyrosine Phosphatase-1B,PTP-1B)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)及葡萄糖转运体-4(Glucose transporter
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目的:通过检测维生素D（Vitamin D,VitD）对妊娠糖尿病（Gestational diabetes mellitus,GDM）小鼠胎盘组织中蛋白酪氨酸磷酸酶-1B（Protein Tyrosine Phosphatase-1B,PTP-1B）、磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）及葡萄糖转运体-4（Glucose transporter-4,GLUT-4）表达的影响,初步探讨维生素D改善GDM小鼠糖代谢、IR的可能机制。方法:选用4-5周龄C57BL/Ks J（野生型,WT）雌性小鼠30只,雄性小鼠15只,在室温18℃28℃、相对湿度40%70%的开放系统饲养;4-5周龄VDR基因敲除雌性小鼠8只,雄性小鼠4只,在本校SPF级动物饲育室中的独立通风笼具中饲养。发情期将雌性和雄性小鼠2∶1合笼饲养,在光学显微镜下同时观察到阴栓和活动精子,记为妊娠第一天,VDR基因敲除小鼠取出单笼饲养,C57BL/Ks J小鼠1-3只/笼饲养。受孕后随机分为正常妊娠组（NC组,n=10）、妊娠糖尿病组（A组,n=10只）、妊娠糖尿病+VitD干预组（B组,n=10只）、妊娠糖尿病+VitD干预+VDR基因敲除组（C组,n=8只）。GDM小鼠给予高糖高脂饲料喂养4周后,妊娠第1天所有GDM组小鼠单次腹腔内注射25 mg/kg链尿佐菌素;NC组:同日单次腹腔注射等量柠檬酸钠缓冲液。孕4天测小鼠非空腹血糖,如血糖≥6.7mmol/L则模型复制成功。模型成功后继续高糖高脂饲料喂养。B组及C组的孕鼠均于妊娠第8天（GD8）至妊娠第14天（GD14）,每天早上空腹给予1,25二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitamin D3,1,25（OH）2D3]溶于0.05ml花生油0.03ug/（k?d）灌胃。NC组、A组给予等量花生油灌胃,在孕19天处死小鼠,检测一般生化指标,采用RT-PCR及Western blot分别检测各组小鼠mRNA、蛋白的表达。结果:与NC组比较,A组及C组FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC水平均升高,HDL-C水平均降低（P<0.05）;与A组比较,B组FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C水平降低,HDL-C水平升高（P<0.05）,而C组FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低（P<0.05）;与B组比较,C组FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低（P<0.05）。各组小鼠PTP-1B、PI3K及GLUT-4 mRNA、蛋白表达的比较:与NC组比较,A组及C组PTP-1BmRNA、蛋白表达水平升高,PI3K及GLUT-4 mRNA、蛋白表达水平均降低（P<0.05）,而B组PTP-1B mRNA、蛋白表达水平,差异无统计学意义（P>0.05）,PI3K及GLUT-4 mRNA、蛋白表达水平均降低（P<0.05）;与A组比较,B组PTP-1B mRNA、蛋白表达水平降低,PI3K及GLUT-4 mRNA、蛋白表达水平升高（P<0.05）,而C组PTP-1B mRNA、蛋白表达水平明显升高,PI3K及GLUT-4mRNA、蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与B组比较,C组PTP-1B mRNA、蛋白表达水平明显升高,PI3K及GLUT-4 mRNA、蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论:维生素D可能通过上调GDM小鼠胎盘组织中PI3K、GLUT-4表达,下调PTP-1B表达,从而改善GDM小鼠的糖代谢及IR。
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