泡菜中蛔虫卵分子鉴定技术研究

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为了防止类似2005年输韩泡菜事件的再次发生,为我国进出口泡菜及相关产品的检验检疫提供技术支持,我们进行了泡菜及相关产品中寄生虫卵分离方法的研究和蛔虫卵的回收率试验。建立了包括0.5%SDS溶液洗脱、过滤、离心沉淀、饱和食盐水溶液漂浮、麦克马斯特氏(McMaster)虫卵计数板观察计数等一系列程序的虫卵检验操作规程。结果表明:蛔虫卵的回收率为35.1%。为了精确地对从泡菜及相关产品中发现的寄生虫卵进行种类鉴定,同时与植物本身的线虫卵进行区别,我们在上述研究的基础上,以污染泡菜风险最高的蛔虫卵作为检测目标,进行了模拟阳性泡菜样品中携带蛔虫卵的荧光PCR检测技术研究,即以猪蛔虫基因组DNA为模板,建立了蛔虫特异性荧光PCR检测方法。其中包括对猪蛔虫卵不同破壳处理方式的比较、液氮/37℃反复冻融蛔虫卵的前处理方式、单蛔虫卵的荧光PCR检测技术等;并制备了蛔虫目的基因重组质粒。结果表明:上述处理方法和分子鉴定检验技术完全适用于生产泡菜中蛔虫卵的检测使用。
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