论文部分内容阅读
核桃叶斑病是近年来在新疆南疆和田、喀什和阿克苏三个地区发生的一种新病害,症状表现为从叶片叶尖、叶缘开始发病,形成圆形或近圆形、褐色至黑褐色坏死斑,病斑面积不断扩大并逐渐向内扩展,最后连成片造成叶片大面积枯焦坏死。该病害会降低核桃的结实量和果实饱满度,给当地核桃生产和农民的经济收入带来损失。本研究通过对病原菌进行分离培养纯化及接种试验,确定了南疆核桃生产园叶片坏死枯黄的病原,并研究了温度和保湿时间对接种发病的影响;通过观察病原菌的形态学特征并结合分子生物学技术明确病原菌的分类地位;通过菌落生长法和孢子萌发法进行了室内杀菌剂筛选,在此基础上开展药剂小区防效试验,为病害大田防治提供依据。主要研究结果如下:从新疆南疆和田、喀什和阿克苏三个地区的核桃园中采集典型的叶斑病病样,经分离培养纯化获得105个菌株,根据菌落特征的不同将所有菌株大致分成3种类型,在显微镜下观察,它们都属于链格孢属(Alternaria sp.)真菌。从三个地区的分离物中选取30个代表菌株进行大田接种试验,结果表明,除菌株I-11外,剩余29个菌株均引起接种叶片发病,说明大部分菌株都具有致病性。同一地区的菌株致病力有强有弱,不同地区的菌株致病力也不一样,说明菌株与菌株之间的致病力存在差异。不同器官组织上的病菌可以交互感染。伤口接种发病率高于无伤接种发病率,大田接种发病潜育期为7d。温度与保湿时间对核桃叶斑病病原菌接种发病有很大影响,接种发病的最适温度和保湿时间组合为温度28℃,保湿48h,接种发病潜育期最短为6h。通过对病菌菌株的菌丝、菌落特征、分生孢子梗、喙、分生孢子及其成链情况的观察和测量,初步明确了病原菌的分类地位。采用真菌rDNA-ITS通用引物(ITS1F-ITS4)进行PCR扩增并测序,将测序结果在GenBank中进行比对分析并构建系统发育树,进一步验证了形态鉴定的结果,确定核桃叶斑病的病原菌为链格孢Alternaria alternata(Fr.:Fr.)Keissler。通过菌落生长抑制法和孢子萌发法测定,比较8种杀菌剂对核桃叶斑病病原菌(Alternariaalternata)的室内毒力。10%咪鲜胺微乳剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂的EC50值均小于0.30mL/L;25%丙环唑乳油、50%异菌脲可湿性粉剂、50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂的EC50值均小于2mg/L。25%丙环唑乳油、10%咪鲜胺微乳剂、50%异菌脲可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂4种药剂对分生孢子萌发的抑制率均达80%以上。在此基础上,选择10%咪鲜胺微乳剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、25%丙环唑乳油和50%异菌脲可湿性粉剂4种药剂进行田间试验。试验结果表明,10%咪鲜胺微乳剂和10%苯醚甲环唑水分散粒剂对核桃叶斑病有较好的防治效果,防效在78.88%以上。