布鲁氏菌外膜蛋白位于细菌细胞膜的最外层，部分外膜蛋白具有免疫原性和抗原保护作用。本研究的目的是克隆并表达马尔他布鲁氏菌部分外膜蛋白，并检测所表达外膜蛋白的免疫原性。通过分析布鲁氏菌的膜相关蛋白，从中选出27个分泌蛋白和跨膜蛋白，利用PCR扩增方法获得目的基因、凝胶回收试剂盒回收纯化目的片段，然后与酶切回收的表达载体pGEX-4T-2连接构建重组表达质粒，转化BL21感受态细胞，并通过酶切分析、PCR扩增和序列测定分析鉴定重组质粒，结果表明成功构建25个重组表达载体，成功转化并获得22个转化菌株，而且重组质粒中携带的目的基因编码框完全正确。将构建好的融合表达载体在不同浓度的IPTG诱导下在大肠杆菌BL2l中进行表达，通过不断改变诱导时机和诱导温度等条件，共成功诱导表达16个目的蛋白。用野外牛阳性血清进行Western-Blot免疫印迹分析，7个蛋白能够表现出程度不同程度的阳性反应，表明该7个蛋白具有一定的反应原性。该研究为进一步筛选布鲁氏菌病免疫诊断抗原以及蛋白功能研究奠定了基础。