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目的:阿魏酸(FA)具有良好的药理效果,是当归芍药散(Danggui-Shaoyao-San,DSS)治疗神经退行性病变的主要活性成分。FA在动物模型中快速吸收且快速消除,生物利用度低,有研究表明通过配伍可以提高FA的生物利用度。本实验通过Caco-2单层细胞模型验证DSS、当归、川芎和FA在肠上皮细胞的渗透吸收情况,进一步探讨影响这一过程的可能的蛋白靶点以及考察方中其他主要成分对这些靶点的影响;通过大鼠肝微粒体模型考察DSS、当归、川芎和方中主要成分对CYP3A4活性的影响,探讨DSS对FA生物利用度的影响以及机制,为中药复方的配伍治疗提供实验依据。方法:HPLC对DSS、当归和川芎所含的FA定量,然后于Caco-2细胞模型上考察各组的FA的渗透量的比较。给以P-gp和MRP2特异性抑制剂和方中其他单体成分后,考察FA的渗透变化。检测不同组别CYP3A4的特异性代谢产物6β-羟基睾酮来比较不同组别对肝药酶CYP3A4的抑制作用,计算各组的半数抑制率(IC50)来比较各组的抑制效果大小。添加方中其他单体成分于孵育体系中,筛选对CYP3A4有抑制作用的单体。利用HepG2肝癌细胞考察DSS、当归、川芎和FA对外排转运蛋白P-gp和CYP3A4蛋白的表达影响情况;利用ELISA试剂盒检测DSS、当归、川芎和FA对CYP3A4酶活性的影响情况。结果:与单纯给予FA组相比,DSS中FA吸收增加明显(P<0.01)。当归和川芎亦能增加FA的吸收(P<0.01,P<0.01)。与FA单体组相比,丙磺舒组和维拉帕米组的FA吸收显著提高(P<0.01,P<0.01)。方中成分芍药苷、藁本内酯和川芎嗪均可以显著提高FA的渗透吸收(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。酮康唑的IC50为7.645 μ M·L-1,DSS组的IC50为0.1017mg·mL-1,当归组的IC5。为0.2948mg·mL-1,结果显示DSS较当归有更好的CYP3A4抑制作用(P<0.01)。FA对CYP3A4亦有显著抑制作用(P<0.05),芍药苷对CYP3A4活性无明显影响,藁本内酯和川芎嗪对CYP3A4有一定的抑制作用,但是没有显著性意义。DSS和FA对CYP3A4蛋白的表达有抑制作用,但是DSS对之没有显著意义,当归和川芎对CYP3A4促进表达;DSS和当归抑制P-gp蛋白的表达(P<0.05,P<0.05),但是川芎却显示对其有促进表达的作用。ELISA检测结果得,DSS和FA显著抑制了 CYP3A4酶的活性(P<0.05,P<0.05),当归和川芎对CYP3A4活性有一定的促进作用,其结果与WB蛋白结果相似。结论:上述结果表明,DSS、当归和川芎以及方中主要成分芍药苷、藁本内酯和川芎嗪均能增加FA的肠上皮吸收;转运实验和Western-blot检测P-gp结果表明,DSS和FA对外排蛋白P-gp有抑制作用;肝微粒体孵育实验、CYP3A4蛋白检测和ELISA实验表明,DSS抑制CYP3A4酶的活性。综上结果表明,DSS提高FA生物利用度的机制可能是通过抑制外排转运蛋白P-gp和代谢酶CYP3A4来实现。