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背景:犬瘟热（Canine distemper,CD）是由犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）感染引起的可导致多种动物患病的一种急性、高度接触性的共患传染病,不同动物对CDV的易感性和致死率各不相同,死亡率达30%-80%,其中雪貂对CDV最易感,死亡率高达100%。近年来由于环境变化,动物栖息地人为干预,病毒的进化,CDV在自然界具有广泛的宿主,主要有犬科（犬,狐狸,貉子）,鼬科（水貂,貂,雪貂,獾,水獭,黄鼠狼）,浣熊科（浣熊,熊猫）和猫科的大部分成员（狮子,老虎,豹,猎豹）。目前已经扩展到8个科的食肉目、偶蹄目猪科动物、猕猴属灵长类动物和鳍脚亚目海豹,且宿主范围数量逐渐扩大。对我国的养犬业、毛皮动物养殖业以及野生珍稀动物造成严重的危害,带来巨大经济损失,因此研究当前CD流行毒株和对动物的致病性具有很好的现实意义,研究结果将对CD的有效防控具有重要意义。方法:（1）犬瘟热病毒（CDV）分离:将采集到的水貂和狐狸病料与PBS缓冲液按一定比例（1:2）匀浆研磨取上清,经0.22μm滤器过滤除菌后接种于稳定表达犬瘟热病毒SLAM（Signaling Lymphocyte Activation Molecule）受体的Vero-dogSLAM（VDS）细胞,感染后4-6 d后,当出现80%的CPE时,收毒继续传代培养增殖,传至第三代时收毒,测定第三代病毒滴度(TCID50),同时提取病毒RNA,通过RT-PCR的方法检测病毒;（2）RT-PCR鉴定:采用RT-PCR技术,以病毒cDNA为模板克隆CDV H基因RBS（Receptor-Binding Sites）序列,并对扩增出的RBS序列进行比对分析和同源性分析;（3）间接免疫荧光（IFA）鉴定:采用间接免疫荧光（IFA）方法对第三代CDV分离株进行鉴定,同时设立正常的Vero-dogSLAM（VDS）细胞作为阴性对照;（4）动物攻毒实验:对分离到的CDV分离毒株LNDL（17）M4进行致病性研究,攻毒后每天观察并记录临床症状,称体重、测体温,感染死亡的水貂剖检取其肺脏、脾脏、肾脏等内脏组织器官,通过实时荧光定量PCR（Real-time q PCR）的方法检测各组织器官里的病毒载量。结果:（1）分离到了四株CDV,并分别测定病毒滴度,LNDL（17）M4分离株的病毒滴度最高(10-5.23 TCID50/mL);（2）CDV H RBS区克隆测序分析结果表明同源性为93%以上,证明为CDV阳性;（3）分离到的CDV毒株在细胞质中完成复制,出现特异性绿色荧光,阴性对照组Vero-dogSLAM（VDS）细胞未出现特异性绿色荧光,进一步鉴定了分离到的是CDV毒株;（4）攻毒后,水貂出现体温升高,眼鼻出现大量浓稠分泌物,结膜炎等典型的犬瘟热症状,攻毒后7 d和12 d分别通过眼鼻分泌物和粪便向外界排毒。结论:分离并鉴定了四株CDV分离株;LNDL（17）M4分离株为强毒株;LNDL（17）M4分离株在淋巴组织中含量高,对该组织器官的侵染能力最强,能够造成水貂继发感染而死亡。