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朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)别名三枝九叶草、羊藿叶,为小檗科(Berberidacea)淫羊藿属(Epimedium)多年生草本植物,是长白山特有的传统补益类中药,也是药典中5种淫羊藿正品药材中药质最佳品类。因其耐阴、抗旱,叶形独特、美观,近年国外较多将其作为优质地被花卉种类应用,也向中国出口。但长白山区朝鲜淫羊藿野生资源因掠夺式开发濒于枯竭,近些年农民自发种植热情较高,种源均盗挖野生品,致使种苗稀缺,因此开展朝鲜淫羊藿繁殖技术,尤其是组织培养技术研究其意义重大,不仅满足种苗供给、保护野生资源,其药用价值与观赏特性也将是未来森林旅游、农业田园综合体及特色产业项目中的新宠。本研究以朝鲜淫羊藿不同外植体为试验材料,在外植体消毒方式、愈伤组织诱导、增殖与分化、丛生芽诱导与增殖、生根培养等方进行系统研究,旨在筛选出每阶段适宜的培养因素和培养条件。主要研究结果如下:1、外植体筛选与灭菌:幼嫩叶尖、幼嫩叶柄分枝点、种胚和根茎顶芽为最佳外植体;叶尖和叶柄分枝点消毒比较容易,均采用体积分数2%NaClO消毒6min,存活率分别71.67%和73.33%。种胚消毒相对较难,利用0.1%HgCl2在种子表面消毒8min,再对种胚消毒5s,该条件下种胚存活率为71.11%。根茎顶芽消毒最难,先用0.2%HgCl2并加入两滴吐温处理4min,接着再用0.1%HgCl2处理3 min,存活率为52.5%。2、愈伤组织诱导:叶尖愈伤组织诱导适宜培养1/2MS+2,4-D2.0 mg·L-1+6-BA0.4m g·L-1+NAA0.5 mg·L-1,诱导率为48.33%,叶柄分枝点最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg·L-1+6-BA 0.2 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,诱导率为31.67%。在不同光照和低温处理时间对叶尖和叶柄分枝点愈伤组织的研究中发现:叶尖和叶柄分枝点分别在弱光、4℃低温处理4 d和6 d的条件下有较好的诱导效果。种胚愈伤组织适宜的培养基1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,诱导率最高为47.78%。3、愈伤组织增殖与分化:叶尖愈伤组织适宜增殖培养基1/2MS+NAA1.0mg·L-1,增长率为122.03%;种胚愈伤组织适宜的增殖培养基为1/2MS+KT0.5mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,增长率为172.67%。叶尖愈伤组织在(4±0.5)℃低温处理180d后能够分化,分化率为54.4%;种胚愈伤组织较容易分化,室温条件即可,1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.4mg·L-1,分化率为65.83%。4、丛生芽诱导与增殖培养:以朝鲜淫羊藿根茎顶芽和种胚为外植体进行组织培养,均诱导出丛生芽。影响根茎顶芽诱导丛生芽最佳单因素条件为:去除顶芽的接种方式,采用1/2WPM基础培养基、6-BA 2.0 mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+IBA1.0mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1植物激素配比、4℃低温处理外植体6d。种胚诱导丛生芽最佳培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1,诱导率为43.33%。丛生芽增殖适宜的培养基:1/2MS+KT1.0mg·L-1+NAA0.4mg·L-1,增殖系数为2.35;1/2MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.4mg·L-1,增殖系数为2.78。丛生芽在两种培养基上均长势良好。5、生根培养:适宜幼苗生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg·L-1+0.05%活性炭,生根率为48.89%,每株24条根,且幼苗生长旺盛。