小鼠白细胞介素-4、6对生长抑素基因疫苗免疫效果的影响

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生长抑素基因疫苗是将合成的生长抑素基因与表达质粒载体重组构建而成的表达质粒。它利用生长抑素(SS)免疫中和调节机理,即以该苗免疫家畜,产生生长抑制激素(SS)抗体,中和家畜体内生长抑素,相对地使内源性生长激素(GH)增加,从而促进家畜生长。基因佐剂(gene or genetic adjuvant)可将编码某些细胞因子及T、B细胞表面共刺激因子等的基因与目的基因克隆于同一载体或不同载体共同免疫动物,其表达的相应蛋白起到佐剂的作用,可大大增强T、B细胞的免疫应答水平。白细胞介素-4是由活化的Th2细胞产生的一种细胞因子,具有多种生物学功能。小鼠白细胞介素-4(mIL-4)是小鼠免疫调节系统中具有重要功能的细胞因子,利用白介素-4可以促进抗体产生,介导体液免疫反应,调节机体的免疫功能,增强机体的免疫应答水平的功能,将其作为基因佐剂与生长抑素基因疫苗在机体内共表达。IL-6是迄今发现的功能最为广泛的细胞因子之一,大量的基础及应用研究证明,IL-6是机体免疫网络中最重要的细胞因子,可促进B淋巴细胞分化和抗体蛋白的分泌,诱导细胞毒性T细胞活化,增强IL-2诱导的LAK细胞的杀伤瘤细胞的活性,可明显促进小鼠骨髓移植后的免疫功能重建,因而有增强免疫的功能。鉴于白细胞介素是动物免疫应答调节中十分关键的细胞因子,而白细胞介素-6在小鼠的免疫防御感染和免疫应答调节中发挥着非常重要的作用,因此,我们进行了小鼠脾脏淋巴细胞白细胞介素-6的基因克隆,为下一步工作打下基础。本试验应用小鼠脾细胞分离技术,分离得到了小鼠脾细胞。将脾细胞进行体外培养,在Con A的刺激诱导下培养24~48h后。提取培养的小鼠脾细胞的总RNA,应用RT-PCR扩增获得了小鼠脾细胞白细胞介素-4及白细胞介素-6基因的cDNA,并构建真核表达质粒,作为生长抑素基因疫苗的佐剂,与生长抑素基因疫苗共转染动物,考察白介素-4及白介素-6对生长抑素基因疫苗免疫效果的影响,以期提高生长抑素抗体水平,更好的中和体内的生长抑素,从而使生长激素水平相对增加,达到更有效的促生长的目的。
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