骨缺损是骨科常见疾病，很多骨缺损由于间隙大而不能自然愈合。到目前为止，修复这些骨缺损的主要方法是骨移植。骨移植有自体骨移植、异体骨移植和异种骨移植三种。自体骨移植取骨区域有限及并发症的存在以及异体骨同样存在来源有限并有感染疾病的危险，因此人们把目光转向异种骨。异种骨来源广泛，但是未经处理的异种骨不仅有传染疾病的可能性而且有较严重的免疫排斥反应。为此，人们已经并正在研究异种骨用于骨缺损修复的较好的处理方法。目前研究较多的是采用氧化剂的方法来处理异种骨以消除其中的抗原性，并取得一定进展。但是采用氧化剂的方法造成了异种骨力学性能变差以及经处理后的异种骨生物功能性不佳的缺点。所以，有必要寻找更好的处理方法以适应骨修复的需要。经过异种骨成分分析以及考虑骨缺损修复对材料的要求，选择用酶去除异种骨中非胶原蛋白而保留胶原蛋白和无机质，从而既消除异种骨的抗原性又保证经处理后的异种骨有较好的力学性质和生物学性能。选择猪股骨密质骨作为研究对象，异种骨的处理包括前处理、脱脂、酶处理三个过程。以骨中氮的含量为指标分析脱脂条件对异种骨脱脂的影响，当异种骨中含氮量基本不变时为最佳脱脂条件。实验发现脱脂48小时即能够脱除异种骨中的大部分脂肪。通过测定酶解溶出的羟脯氨酸量以确定酶处理中骨胶原蛋白的损失，实验发现酶处理对异种骨中胶原破坏较小，溶出的羟脯氨酸不超过0.55%。同时，酶处理后的异种猪骨拉伸强度没有降低，表明酶处理对异种猪骨中胶原及胶原与无机质的结合不造成有害影响。以色氨酸含量为指标分析酶解条件对去除非胶原蛋白的影响，发现浓度1%、pH8.0的酶溶液有较好效果。研究还发现，1%的低温软化酶作用时间应至少在18小时以上才能较好地除去异种骨中非胶原蛋白。用红外光谱检测了解异种骨经各次处理后的成分的变化，并用X射线衍射分析处理过程骨盐结晶的破坏情况，发现异种骨经处理后脂质减少，羟基磷灰石结晶状态变化不大。为了了解异种骨经处理后是否还存在强烈的抗原性，设计家兔桡骨中段1.5cm缺损，将酶处理后的异种骨植入。经酶联免疫吸附染色，证实经酶处理后的异种骨去除抗原性效果良好。结合理化性质的测试，表明异种骨经酶处理后具有优良的综合性能，是一种有潜力的骨缺损修复材料。本课题的创新在于采有酶处理的方法，不破坏异种骨中胶原与骨盐的天然状态，从而使异种骨免疫反应轻而且有利于骨细胞的粘附、生长和功能表达；同时，加工中不破坏异种骨的框架结构，从而使加工后的异种骨有较好的力学强度。<WP=5>