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巨噬细胞在固有免疫和适应性免疫方面扮演着重要的角色,可以杀死病原微生物、呈递抗原、分泌化学介质、吞噬入侵的外来物质、发生氧化应激反应。它们与细胞如T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、中性粒细胞和成纤维细胞相互作用。活化的巨噬细胞产生大量的多功能性化合物包括细胞因子、活性氧等。与小鼠相比,家禽游离的呼吸道巨噬细胞(free respiratory macrophages,FARM)非常少。而鸡出壳后就会马上进行呼吸,此时呼吸道就会接触到空气中的微生物。那么出壳初期,鸡呼吸道巨噬细胞能否给予呼吸道及时、有效的保护?本研究将会围绕这些问题进行讨论。本试验分为体内和体外两部分:体内部分分别于1、4、7、14、21、28日龄时点眼免疫新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)弱毒疫苗,各日龄组分别于免疫后6h、12h、24h、4d、7d通过免疫组化染色方法检测雏鸡肺脏中巨噬细胞、NDV定位及吞噬情况;通过荧光定量PCR方法检测各日龄雏鸡肺脏中IL-1β、IL-6和iNOS的表达情况;体外部分分别从1、4、7、14、21、28日龄雏鸡肺脏中分离巨噬细胞,体外与荧光标记的聚苯乙烯颗粒共同培养,使用荧光显微镜和流式细胞术对巨噬细胞的吞噬能力进行检测;通过ELISA方法对巨噬细胞分泌的IL-1β、IL-6和iNOS进行检测,探究不同日龄雏鸡肺脏中巨噬细胞吞噬能力的变化。体内试验结果显示:1日龄时雏鸡肺脏中有巨噬细胞出现并且随日龄的增长不断增加,28日龄时达到最大值。雏鸡1日龄时,巨噬细胞于房间隔处出现,之后随肺脏发育,逐渐扩散至呼吸毛细管壁、小叶间结缔组织周围等。另外,4-14日龄时雏鸡肺脏中IL-1β、iNOS表达量没有显著变化,14日龄时IL-1β达到峰值,28日龄时iNOS达到峰值,。1-7日龄,雏鸡肺脏中IL-6相对表达量逐渐上升,7-21日龄几乎没有变化,28日龄时达到最大值。体外试验结果发现:随着年龄的增长,肺脏巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数均呈不断上升趋势。其中吞噬率在7日时显著增长。吞噬指数分别在21日龄和28日龄时增长较为显著。另外,4-14日龄时雏鸡肺脏巨噬细胞中IL-1β、iNOS均无明显变化。14-28日龄IL-1β的表达量逐渐上升。随着年龄的增长,肺脏巨噬细胞分泌的IL-6逐渐增多。体内试验和体外试验共同表明:雏鸡肺脏巨噬细胞随着日龄增长逐渐增多,1-7日龄吞噬功能还没有发育完全。28日龄时巨噬细胞达到最大值,同时吞噬率、吞噬指数和iNOS均达到最大值。各日龄组接种NDV 24小时后,巨噬细胞数量及其吞噬率达到峰值。本试验对不同日龄雏鸡肺脏中巨噬细胞的发育及吞噬功能进行研究,为禽类巨噬细胞的进一步研究奠定理论基础,并为禽类免疫发育的研究提供参考依据。