白藜芦醇通过TLR4/NF-κB通路减轻缺氧/复氧诱导的肝细胞损伤

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目的:探讨白藜芦醇在缺氧/复氧诱导的大鼠肝细胞损伤中的保护作用,及其对肝细胞TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法:首先分别用RES和TLR4抑制剂(HTA125)预处理细胞,然后构建H/R模型,通过CCK-8实验法和流式细胞术检测细胞存活率及检测细胞凋亡;采用HE染色观察细胞形态变化;化学检测法和ELISA实验法检测细胞培养液中谷丙转氨酶及炎症因子含量;RT-PCR及Western blot技术检测细胞TLR4,NF-κB p65基因在mRNA及蛋白水平表达,免疫荧光检测NF-κB p65在细胞核表达情况。结果:H/R条件使细胞存活率明显降低,细胞凋亡率增加,受损细胞明显增多,ALT、IL-1β含量增多,TLR4和NF-κB p65表达水平显著提高,p65入核细胞比例提高;经RES及HTA125预处理后,细胞存活率显著提高,细胞凋亡比例显著缩小,受损细胞减少,ALT、IL-1β含量降低,TLR4和NF-κB p65表达水平明显降低,p65入核细胞比例下降。结论:RES能减轻H/R诱导的BRL-3A肝细胞损伤,该保护作用可能RES与抑制TLR4/NF-κB信号通路传导有关。
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