【摘 要】
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目的:探讨miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶1（DNMT1）、DNA甲基转移酶3A（DNMT3A）和DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法:选用人卵巢癌细胞株（A2780）和人卵巢癌顺铂耐药细胞株（A2780/DDP）,用实时荧光定量PCR法（q RT-PCR）对A2780细胞株和A2780/DDP细胞株中的miR-200b与miR-200c表达
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目的:探讨miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶1（DNMT1）、DNA甲基转移酶3A（DNMT3A）和DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法:选用人卵巢癌细胞株（A2780）和人卵巢癌顺铂耐药细胞株（A2780/DDP）,用实时荧光定量PCR法（q RT-PCR）对A2780细胞株和A2780/DDP细胞株中的miR-200b与miR-200c表达量进行检测。采用瞬时转染法对耐药细胞株A2780/DDP分别进行miR-200b mimics、miR-200c mimics及阴性对照（NC）转染,将实验分为miR-200b组、miR-200c组及NC组,用荧光显微镜查看细胞的转染情况,计算转染率;CCK8法检测3组细胞转染后的IC50值;蛋白印迹免疫法（Western blot）检测3组细胞转染后DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平;流式细胞术检测3组细胞转染后的细胞凋亡率。结果:1、q RT-PCR结果显示A2780细胞系中miR-200b与miR-200c表达高于A2780/DDP细胞系（P＜0.05）。2、CCK8法结果显示miR-200b组、miR-200c组的IC50值低于NC组（P＜0.05）,而miR-200b组和miR-200c组两组的IC50值无明显差异（P＞0.05）。3、Western blot结果显示miR-200b组、miR-200c组的DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平均低于NC组（P＜0.05）,而miR-200b组、miR-200c组的DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达无差异（P＞0.05）。4、流式细胞术结果显示转染后A2780/DDP细胞株的各组细胞随顺铂浓度的增加,凋亡率逐渐增加,但差异无统计学意义（P＞0.05）,在相同药物浓度处理下,A2780/DDP细胞株的miR-200b组及miR-200c组凋亡率高于NC组（P＜0.05）,而miR-200b组及miR-200c组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:miR-200b与miR-200c高表达能抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因表达,逆转耐药卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。
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