卵泡内激素的变化(内环境)对卵泡生长发育的影响是近年来医学和生物学界研究的热点。大量研究证明卵泡内环境与卵泡直径和机体的生殖性能息息相关。本试验通过对猪卵泡内激素水平的分析,肾素醛固酮受体在水牛和猪的卵巢、睾丸组织中的表达定位研究,初步探讨卵巢内环境的激素变化对卵子的发生发育的影响,对卵巢内环境的深入研究提供一定的理论支撑。试验一：将新鲜采集的猪卵巢上的卵泡按照直径2mm、3mm、4mm、5m、6mm分组收集卵泡液。通过化学荧光分析法,测定不同卵泡直径卵泡内肾素、血管紧张素、醛固酮、孕酮、雌二醇等共15种激素水平。结果显示：猪卵泡平均直径与卵泡液肾素、醛固酮、雌激素与孕酮成显著正相关关系；三碘甲腺原氨酸、游离T3、游离T4、甲状腺结合球蛋白皮质醇和血清生长素的含量与卵泡直径大小不具有显著相关关系；猪卵泡液内雌激素与孕酮激素呈极显著正相关关系；卵泡内激素,其中肾素对卵泡直径大小的影响最大。试验二：采集新鲜猪和水牛卵巢睾丸组织并固定。制作组织切片后进行二步法免疫组织化学染色法,结果显示：肾素受体在水牛和猪的卵巢各级卵泡发育过程中都有明显的表达,定位基本相同,定位主要在卵母细胞和颗粒细胞处。水牛与猪的睾丸切片也可明显观察到肾素受体的表达,睾丸受体定位于在精曲小管和各级精母细胞中。从而推知在体内的内分泌途径中,肾素可能通过旁分泌、自分泌的方式与性腺组织中的受体结合,从而影响了配子的发生。实验三：采集新鲜猪和水牛卵巢睾丸组织并固定。制作组织切片后进行二步法免疫组织化学染色法,结果显示：水牛与猪的卵巢切片中各级卵泡的颗粒细胞和卵母细胞中醛固酮受体均有明显表达,呈现阳性显示。根据结果推测：醛固酮受体存在于卵泡发育的各个阶段,卵巢中可能具有组织肾素-血管紧张素-醛固酮系统,其对颗粒细胞及卵母细胞发育的有重要作用。