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本研究通过翻背试验和装车应激试验,比较了二花脸猪和皮特兰猪应对应激的品种特征;采用RT-PCR测定了下丘脑CRH和垂体CRHR1 mRNA的表达,并分析运输应激对这些基因mRNA表达的影响及其品种差异;应用PCR-SSCP法检测了二花脸猪、皮特兰猪、皮特兰×二花脸F2代猪(F2代猪)CRH基因的多态性,并分析该基因的多态性与F2代猪应激后肉质的相关性,以揭示下丘脑CRH和垂体CRHR1表达与应激反应品种差异的关系,并探讨CRH多态性作为猪抗应激育种分子标记的可能性。1二花脸和皮特兰猪抵抗应激的品种特征氟烷基因显性纯合子(HalNN)二花脸猪和氟烷基因隐性纯合子(Halnn)皮特兰猪分别进行翻背和装车试验,分析装车前后血液生理生化指标的变化。结果表明:(1)3、10、17日龄二花脸猪的翻背试验评分(Backtest Score,BS)均显著低于同日龄皮特兰猪(P<0.001);(2)二花脸猪在装车前血浆皮质醇水平显著高于皮特兰猪(P<0.01),肌酸激酶活性(Creatine Kinase,CK)显著低于皮特兰猪(P<0.001),而乳酸脱氢酶活性(Lactate Dehydrogenase,LDH)品种间差异不显著;(3)装车使皮特兰猪血浆皮质醇水平显著上升(P<0.05),而二花脸猪血浆皮质醇水平在装车前后差异不显著,血浆中CK和LDH活性在装车前后无显著变化。结果提示:HalNN的二花脸猪对翻背和装车应激的敏感性均低于Halnn的皮特兰猪。2猪促肾上腺皮质激素释放激素及其1型受体mRNA表达二花脸猪和皮特兰猪各自分成对照组和运输组,对照组不参加运输,而运输组经2h卡车运输后与对照组同时屠宰采样,采用RT-PCR方法测定下丘脑CRH和垂体CRHR1mRNA表达。结果表明:(1)二花脸猪下丘脑CRH mRNA表达水平有低于皮特兰猪的趋势(P=0.07),二花脸猪运输组CRH mRNA表达较对照组显著上升(P<0.05),而皮特兰猪运输组CRH mRNA表达无明显变化;(2)皮特兰猪运输组垂体CRHR1 mRNA的表达显著下调(P<0.05),而二花脸猪运输组与对照组相比差异不显著。提示:运输应激状态下,二花脸猪和皮特兰猪下丘脑CRH和垂体CRHR1基因表达存在品种差异,这种差异可能与两品种猪的应激敏感性有关。3猪促肾上腺皮质激素释放激素DNA多态性为了寻找猪应激敏感的分子遗传标记,在研究应激相关功能基因CRH表达的基础上,采用PCR-SSCP方法检测二花脸猪、皮特兰猪以及皮特兰×二花脸F2代杂交猪CRH基因的多态性。结果表明:(1)未能检测到CRH基因c.83位点的突变;(2)检测到皮特兰猪、F2代猪CRH g.233位点的突变,其突变的基因频率分别为0.46和0.29,而二花脸猪该位点未发生突变;(3)CRH g.233突变与F2代猪应激后背最长肌剪切力(P=0.05)有相关的趋势。提示CRH g.233可能能够应用于猪的抗应激选育。