【摘 要】
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目的:探讨体外来那替尼(Neratinib)是否通过抑制HER2的表达从而抑制人骨肉瘤细胞的增值、侵袭和迁徙,及其相关分子机制,为进一步研究来那替尼治疗骨肉瘤的分子机制奠定基础。
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目的:探讨体外来那替尼(Neratinib)是否通过抑制HER2的表达从而抑制人骨肉瘤细胞的增值、侵袭和迁徙,及其相关分子机制,为进一步研究来那替尼治疗骨肉瘤的分子机制奠定基础。方法:采用0,1,2,3,4,5μmol/L浓度的Neratinib作用人骨肉瘤细胞U2-OS和143B。1、CCK8检测U2-OS和143B细胞增殖能力。2、Wound healing实验用来检测细胞的迁徙能力。3、Transwell invasion实验用来检测细胞的侵袭能力。4、Western blot检测U2-OS和143B细胞中HER2、p-HER2(Tyrosine 877)、Beclin-1、LC3B(Ⅱ、Ⅰ)、PI3K、p-AKT及AKT蛋白表达水平。结果:来那替尼能有效抑制U2-OS和143B细胞的增殖,且在24 h内呈剂量依赖型,24 h IC50(U2-OS)为2.431μmol/L,24 h IC50(143B)为2.966μmol/L。来那替尼处理组细胞的迁徙和侵袭力均显著低于对照组(P<0.05)。来那替尼处理组细胞中HER2、p-HER2、Beclin-1、PI3K、p-AKT蛋白表达水平及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)比率均显著低于对照组(P<0.05)。结论:1、骨肉瘤U2-OS和143B细胞中的HER2基因被沉默后,其部分生物学特征明显发生了改变,如:细胞的增殖、侵袭、迁移能力均被抑制。2、来那替尼能够抑制U2-OS和143B细胞中的Beclin-1蛋白表达及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)比率。3、来那替尼能够抑制U2-OS和143B细胞中的HER2-PI3K/AKT信号通路。
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