【摘 要】
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目的:研究TDLN细胞体内外抗肿瘤作用,初步探讨TDLN细胞的作用机理,改良TDLN细胞的培养方法,为肿瘤特异性生物治疗提供新思路。方法:1肺癌患者TDLN细胞悬液的制备。2肺癌组织
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目的:研究TDLN细胞体内外抗肿瘤作用,初步探讨TDLN细胞的作用机理,改良TDLN细胞的培养方法,为肿瘤特异性生物治疗提供新思路。方法:1肺癌患者TDLN细胞悬液的制备。2肺癌组织单细胞悬液的制备。3肺癌细胞抗原制备。4 TDLN细胞的活化:将患者TDLN细胞悬液( 1×106/ml)加入24孔板中(1 ml/孔),分为三组,分别加入不同的刺激物。第一组加入IL-2(175U/ml);第二组加入IL-2(175U/ml)+自身tAg(50μg/ml);第三组加入IL-2(175U/ml)+ GM-CSF(500U/ml)+ IL-4(100U/ml)+自身tAg(50μg/ml)。置37℃,5%CO2培养箱中培养。5 TDLN细胞的异倍体检测。6 TDLN细胞的免疫表型分析:经过活化的TDLN细胞培养14天后加入FITC-anti-CD83、FITC-CD3/PE-CD56和FITC-CD4/PE-CD8单克隆抗体,室温孵育30min,PBS洗涤2次,用流式细胞仪分析。7细胞因子检测:调整TDLN细胞浓度至2×105/ml,加入24孔板中(1 ml/孔),分为三组,第一组加入IL-2(175U/ml);第二组加入IL-2(175U/ml)+自身tAg(50μg/ml);第三组加
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