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目的:宫颈癌是多因素、多步骤、连续演变的复杂疾病。阴道微生态与宫颈癌的关系日益引起各国学者的关注,研究显示,阴道微环境因子异常可增加HPV感染的风险,但阴道微环境因子与阴道菌群变化的关系尚不清楚,阴道微环境因子与宫颈病变的研究国内外未见报道。本研究以正常宫颈妇女、宫颈上皮内瘤变患者和宫颈癌患者为研究对象,在分析阴道微环境因子与阴道菌群和宫颈病变关系的基础上,进一步探讨了阴道微环境因子与阴道菌群在不同宫颈病变中的关系和交互作用,以期为建立宫颈癌早期预警模式和防治策略提供科学依据。方法:于2018年1月至2018年6月在山西医科大学第二附属医院,严格按照纳入和排除标准收集在妇产科门诊检查、最终经病理学确诊的正常宫颈（NC）妇女290例,低度宫颈上皮内瘤样变（CIN 1）患者97例、高度宫颈上皮内瘤样变（CIN2/3）患者107例以及宫颈鳞状细胞癌（SCC）患者16例。采用结构式问卷调查宫颈病变相关因素,并收集全部研究对象的阴道分泌物和宫颈脱落细胞。采用导流杂交法检测HPV感染状况,应用需氧菌性阴道炎/细菌性阴道病联合检测试剂盒检测阴道分泌物中的H2O2、唾液酸苷酶和白细胞酯酶,以及PH值和清洁度。进一步对研究对象排除2周内使用抗生素、3天内阴道用药及阴道冲洗的妇女,并经年龄匹配,最终获得正常宫颈妇女22例,CIN 1患者22例,CIN 2/3患者19例,SCC患者10例,进行高通量16S rDNA基因扩增子测序。采用Epidata 3.1软件建立数据库,为满足统计分析需要,资料分析阶段将CIN 1组和CIN 2/3组合并为CIN组,应用SPSS 22.0软件和GraphPad Prism7.0软件进行相关数据的c2检验、logistic回归、Wilcoxon秩和检验。测序完成后,进行生物信息学分析,比较组间的菌群多样性、菌群构成,分析组间特征菌。结果:1.阴道微环境因子与宫颈病变的关系:PH值、H2O2的异常率在NC组、CIN组和SCC组差异有统计学意义（P<0.05）。PH值（OR=1.78,95%CI:1.05-3.01）和H2O2（OR=1.94,95%CI:1.21-3.12）异常可增加CIN的患病风险,随着宫颈病变的进展PH值(c2趋势=6.53,P=0.011)和H2O2(c2趋势=8.25,P=0.004)的异常率逐渐升高。未发现阴道清洁度、唾液酸苷酶和白细胞酯酶与宫颈病变之间存在明显关联。2.阴道PH值、清洁度、H2O2与阴道菌群的关系:PH值、清洁度和H2O2正常妇女的优势菌属为乳酸杆菌属（Lactobacillus）,比例分别是98.37%、59.60%和95.70%,在PH值、清洁度和H2O2异常妇女中,排名前两位的菌属为乳酸杆菌属（比例分别是47.27%、44.64%、45.20%）和加德纳菌属（Gardnerella,比例分别是17.81%、29.13%、18.81%）。PH值和H2O2正常妇女的特征菌属为乳酸杆菌属,PH值异常妇女的特征菌属为加德纳菌属和奇异菌属（Atopobium）,H2O2异常妇女的特征菌属为加德纳菌属,清洁度正常和异常妇女中未发现明显的特征菌。PH值、清洁度和H2O2异常妇女的阴道菌群多样性高于正常者（P<0.05）。3.唾液酸苷酶和白细胞酯酶与阴道菌群的关系:唾液酸苷酶和白细胞酯酶正常妇女的优势菌属为乳酸杆菌属,比例分别是59.99%和62.19%,唾液酸苷酶和白细胞酯酶异常妇女的优势菌属为加德纳菌属,比例分别是36.23%和30.23%。白细胞酯酶正常妇女的特征菌为芽孢杆菌纲（Bacilli）和厚壁菌门（Firmicutes）,白细胞酯酶异常妇女的特征菌属为嗜胨菌属（Peptoniphilus）、普氏菌属（Prevotella）和卟啉单胞菌属（Porphyromonas）,唾液酸苷酶正常和异常妇女中均未发现明显的特征菌。白细胞酯酶异常妇女的阴道菌群多样性高于正常者（P<0.05）。4.阴道微环境因子与阴道菌群在宫颈病变中的关系和交互作用:对与宫颈病变有关的阴道微环境因子PH值和H2O2,进行了阴道微环境因子与阴道菌群在宫颈病变中的关系和交互作用分析,结果显示,NC组PH值正常与异常妇女以及H2O2正常与异常妇女的优势菌属均为乳酸杆菌属,比例分别是99.20%与69.25%以及92.96%与63.25%,PH值与H2O2正常妇女的特征菌属为乳酸杆菌属,PH值异常妇女的特征菌属为小杆菌属（Dialster）,H2O2异常妇女的特征菌属为葡萄球菌属（Staph ylococcus）和乳球菌属（Lactococcus）,未发现NC组PH值与H2O2异常妇女的阴道菌群多样性高于正常者（P>0.05）;CIN组PH值正常与异常妇女以及H2O2正常与异常妇女的优势菌属均为乳酸杆菌属,比例分别是97.00%与52.45%以及92.15%与51.03%,PH值与H2O2正常妇女的特征菌属为乳酸杆菌属,PH值异常妇女的特征菌属为厌氧球菌属（Anaerococcus）、小杆菌属、微单胞菌属（Parvimonas）、气球菌属（Aerococcus）,H2O2异常妇女的特征菌属为加德纳菌属、奇异菌属、动弯杆菌属（Mobiluncus）、孪生球菌属（Gemella）、小杆菌属、厌氧球菌属、微单胞菌属,PH值与H2O2异常妇女的阴道菌群多样性高于正常者（P<0.05）;在SCC组,PH值正常妇女的优势菌属为乳酸杆菌属（96.80%）,SCC组H2O2检测结果均为异常,PH值与H2O2异常妇女的优势菌属为嗜胨菌属,比例分别为22.68%和22.76%,未发现PH值正常与异常妇女以及H2O2异常妇女的特征菌属,未发现PH值异常妇女的阴道菌群多样性高于正常者（P>0.05）;采用相加交互作用模型分析显示,PH值和H2O2异常与菌群多样性增加在CIN组存在正相加交互作用,在SCC组未发现相似结果。结论:1.阴道微环境因子异常可增加宫颈上皮内瘤变的患病风险,提示加强阴道微环境因子检测,维持阴道微环境的稳定,对于预防宫颈上皮内瘤变及阻断宫颈癌的进程具有重要意义。2.阴道微环境因子异常妇女的阴道菌群多样性增加,特别发现了阴道微环境因子不同状态下的优势菌和特征菌,提示阴道微环境因子的检测可为评价阴道菌群变化和调节阴道菌群提供重要参考依据。3.不同宫颈病变中,阴道微环境因子异常妇女阴道菌群多样性增加,特别发现阴道微环境因子不同状态有不同的优势菌和特征菌,阴道微环境因子异常与阴道菌群多样性增加在宫颈上皮内瘤变组存在正相加交互作用,提示同时开展阴道微环境因子和阴道菌群的检测,从调节阴道微生态的角度对宫颈病变的早期发现和阻断宫颈癌的进程具有重要意义。