【摘 要】
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绵羊是世界上重要的经济动物之一,为了提高绵羊的生产效率,鉴定与生长性状相关的分子标记一直是畜牧育种工作者的重要工作之一。传统育种需要长时间的观察和试验,分子标记育种技术可以快速地筛选和精确地评估、选择绵羊遗传物质中的具有潜力的优异基因型,从而提高畜产品的产量和质量,绵羊遗传质量和优良性状的稳定性,进而提高绵羊产业的经济效益。MYLK4（Myosin Light Chain Kinase 4,肌球蛋
【基金项目】
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国家民委中青年英才培养计划（[2022]366）； 中央高校基本科研业务费专项资金项目（31920220057、31920220070）; 甘肃省自然科学基金（20JR10RA122）；
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绵羊是世界上重要的经济动物之一,为了提高绵羊的生产效率,鉴定与生长性状相关的分子标记一直是畜牧育种工作者的重要工作之一。传统育种需要长时间的观察和试验,分子标记育种技术可以快速地筛选和精确地评估、选择绵羊遗传物质中的具有潜力的优异基因型,从而提高畜产品的产量和质量,绵羊遗传质量和优良性状的稳定性,进而提高绵羊产业的经济效益。MYLK4（Myosin Light Chain Kinase 4,肌球蛋白轻链激酶）是一种激酶,在肌肉的收缩中发挥重要作用,与动物的生长性状密切相关。研究表明,MYLK4参与了肌肉收缩、细胞增殖和分化,是肌肉发育过程中重要的调控因子。MTPN（Myotrophin,肌侵蛋白）基因编码的蛋白质是一种结合蛋白,参与并维护了肌肉的发育。相关研究表明,MTPN基因编码的蛋白质可能通过与Myo D蛋白相互作用,在调控动物肌肉细胞的增殖、分化和重塑细胞外基质等多个方面产生了重要的影响。本研究通过对两个候选基因编码的氨基酸理化性质、跨膜结构域等进行生信分析,对可能影响绵羊主要生长性状的SNP进行挖掘,并在共计1557个成年绵羊个体中通过PCRSSCP结合一代测序技术进行了实验验证,以期为绵羊的分子标记育种提供参考。本研究的主要结果如下:1.绵羊MYLK4及MTPN基因生物信息学分析利用绵羊MYLK4、MTPN基因核苷酸序列数据,对两个基因编码的氨基酸序列进行理化性质分析,研究表明前者编码的产物为不稳定的蛋白,而后者编码的产物则为稳定的蛋白。对MYLK4、MTPN跨膜结构域进行预测,没有发现跨膜结构域的存在;在两个基因编码蛋白质的亲/疏水性分析中,都表现出了很强的亲水性,证明MYLK4、MTPN皆不属于跨膜蛋白质。在两个基因的多序列比对和进化分析中发现MYLK4基因和羚羊、山羊的亲缘关系最近,与虎鲸和海豚的最远;绵羊MTPN和山羊亲缘关系最近,与猩猩和人类的最远,进而说明MYLK4、MTPN具有高度的保守性,但存在一定的种属特异性,不同物种间保守性不高。在绵羊MYLK4基因、MTPN基因SNP突变的挖掘中共筛选了14个可能影响绵羊生长发育的SNP位点,其中MYLK4基因有6个多态性变异位点,MTPN基因有8个多态性位点,并在后续实验中验证14个SNP位点与绵羊生长性状的相关性。2.MYLK4基因多态性及其与绵羊主要生长发育性状的关联分析对三种绵羊（共1557只）MYLK4基因多态性与生长性状的关联分析,最终筛选到2个对生长性状有显著影响的多态位点（g.50049402 G＞C、g.50049360 C＞G）,在g.50049402 G＞C中等位基因C为优势等位基因,CC为优势基因型,此多态位点对于绵羊的胸围、管围、胸宽以及体高有显著影响（P＜0.05）;在g.50049360 C＞G中等位基因G为优势等位基因,GG为优势基因型,此多态位点对于绵羊的体斜长、胸深以及胸围有显著影响（P＜0.05）。3.MTPN基因多态性及其与绵羊主要生长发育性状的关联分析对三种绵羊（共1557只）MTPN基因多态性与生长性状的关联分析,最终确定了1个对生长性状有显著影响的多态位点g.101185485 G＞A,此多态位点的等位基因A为优势等位基因,AA为优势基因型,并显著影响绵羊的体高、胸围、管围等体尺性状。综上,本研究对两个候选基因MYLK4、MTPN基因编码的氨基酸序列进行理化性质分析、挖掘并鉴定了影响绵羊关键生长性状的分子标记,以期为MYLK4基因和MTPN基因在绵羊中的后续研究提供依据,为更加精准高效的绵羊分子标记辅助选择育种提供支持。
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