研究背景瘢痕疙瘩的发病机制迄今未明，患者往往是因为一些非常轻微的损伤(如穿耳、注射或暗疮破溃)或是无明显的诱因而发病，表现为病程长且不稳定，青壮年多发，好发于耳垂、前胸、肩三角肌区以及后背等特殊部位，瘢痕组织的增殖能力强，在一定时期内不会随着时间的推移而降低。多年来，人们尝试用不同的方法来治疗瘢痕疙瘩，但到目前为止无论是手术治疗还是非手术治疗，仍然没有一种理想的治疗方案可以满足患者的需求。虽瘢痕疙瘩并非恶性肿瘤，但其类似恶性肿瘤“疯长”的生物学特性给患者带来极大的痛苦和功能上的障碍，医务工作者也颇感棘手。因此如何预知瘢痕疙瘩易感者就显得十分重要。近年来，在瘢痕疙瘩发病机制和治疗方法上的探索有较大的进展，而对瘢痕疙瘩易感人群的检测和发病风险尚未能有比较深入的研究，若能提前经过简单的检测既能预知高危发病人群及时采取措施，势必有效地进行早期诊断与治疗，减少患者痛苦。本科先前的研究中，发现瘢痕疙瘩外周血淋巴细胞中p53基因外显子4第72位密码子的基因型分布存在多态性，而且这种多态性分布在普通人群及瘢痕疙瘩人群中存在差异。这种分布的差异为临床筛选瘢痕疙瘩易感人群提供了理论及实验依据。同时，为进一步推动研究的临床应用，本课题组在上述发现的基础上，成功研制了p53基因检测试剂盒。目的与意义应用瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒进行大规模的临床筛查，验证此试剂盒的灵敏度和有效性，验证该试剂盒是否能应用于大规模的瘢痕疙瘩易感人群的筛选，以指导临床避免非必需的手术及指导手术后的后续治疗。瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒临床应用的意义在于为临床预测瘢痕疙瘩易感人群的提供一种可能。一旦检测出阳性结果，对于未发病的瘢痕疙瘩易感者可以给予尽早的警示，叮嘱其在平日生活中积极做好自我防护，避免穿耳、挤破暗疮等不必要的损伤，降低危险性；对于必需行手术等有创治疗的易感者，应在手术中和手术后及时做好瘢痕预防性治疗，尽量减少瘢痕疙瘩发生的可能性。对象及方法研究对象：本实验采用随机—对照研究，收集61例临床上证实已患有瘢痕疙瘩患者的外周静脉血样本及相关临床资料，并设立与病例组一一配对的正常对照组，正常对照组为曾有外伤无病理性瘢痕史者，两匹配组间无血缘关系且无肿瘤病史，其年龄、性别和种族大致相同。实验方法：抽取待测人群的外周静脉血，提取全血中的DNA样本；设计扩增p53基因外显子4片段的引物，多聚酶链反应对DNA样本进行扩增；设计与外显子4第72位密码子两种不同等位基因相吻合的探针，制备显色膜条，应用反向斑点杂交技术，通过三种不同的显色结果判定待检者p53基因外显子4第72位密码子的基因型。最后统计分析三种基因型的分布差异，验证瘢痕疙瘩检测试剂盒的灵敏度和有效性。结果与讨论本次实验共检测了122例临床样本血中p53基因外显子4第72位密码子基因型表达。统计病例组和对照组的基因型分布示：瘢痕疙瘩组中p53基因外显子4第72位密码子显示基因型为脯氨酸(C)／脯氨酸(C)型为38人，占总数的62.3％；显示基因型为脯氨酸(C)／精氨酸(G)型为12人，占总数的19.67％；显示基因型为精氨酸(G)／精氨酸(G)型为11人，占总数的18.03％。正常对照组中p53基因外显子4第72位密码子显示基因型为C／C型为21人，占总数的34.43％；显示基因型为C／G型为25人，占总数的40.98％：显示基因型为G／G型为15人，占总数的24.59％。行统计学分析，实验结果显示：在122例样本中，CC基因型为59例，非C／C基因型为63例。检测结果与临床或病理诊断核对后发现，59例CC基因型中瘢痕疙瘩患者为38例，灵敏度为62.3％；63例非CC基因型中瘢痕疙瘩患者为23例，其特异度为65.6％。本试剂盒的阳性预测值为4.15／1000，阴性预测值为998／1000。与以往报道相比，亚洲地区黄色人种的瘢痕疙瘩患病率为2.3／1000，本实验中P53基因第4外显子72位密码子CC基因型的危险性为非CC基因型的2-3倍，其OR值为3.429，携带此基因型的人群具有较高的发病风险。实验结果证明：人类p53基因外显子4中72位密码子C等位基因及CC基因型可能是中国广东地区汉族人群瘢痕疙瘩的易感因素，人类p53基因第72位密码子多态性位点的基因型检测可能是判断瘢痕疙瘩高危个体的客观依据之一；瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒是一种可以初步预测瘢痕疙瘩易感人群的检测手段，为术前筛查瘢痕疙瘩易感人群提供一种全新的方案。全文结论瘢痕疙瘩P53基因检测试剂盒具有检测迅速、使用方便、成本不高等优点，仅需要抽取待检者1ml外周血即可检验，并可当天得到检查结果，及时给予临床工作者避免瘢痕增生的警示和增强易感者自我防治的意识，适合在临床使用；同时本试剂盒灵敏度为62.3％，阴性预测值为998／1000，可作为大规模的瘢痕疙瘩易感人群筛查的手段之一。