【摘 要】
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目的:研究miR-95-5p靶向骨形态发生蛋白2（BMP2）调控脂肪干细胞（ADSCs）成骨分化的作用及机制。方法:提取C57BL/6小鼠腹股沟脂肪组织,经过相关试剂处理后培养ADSCs,并将转染的ADSCs分为阴性对照（NC）mimic的miR-NC组及转miR-95-5pmimic的miR-95-5p组,成骨诱导分化后采用试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）活力,显微镜检测ALP染色,采用茜素红染色
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目的:研究miR-95-5p靶向骨形态发生蛋白2（BMP2）调控脂肪干细胞（ADSCs）成骨分化的作用及机制。方法:提取C57BL/6小鼠腹股沟脂肪组织,经过相关试剂处理后培养ADSCs,并将转染的ADSCs分为阴性对照（NC）mimic的miR-NC组及转miR-95-5pmimic的miR-95-5p组,成骨诱导分化后采用试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）活力,显微镜检测ALP染色,采用茜素红染色检测A570水平,采用Westernblot检测BMP2、Runt相关转录因子2（Runx2）、骨钙素（OCN）的表达水平,用荧光素酶报告基因实验验证miR-95-5p靶向BMP2基因。结果:空白对照组与miR-NC组相比较,ADSCs成骨诱导分化后ALP活力、ALP染色、茜素红染色A570nm水平、BMP2、Runx2、OCN表达水平及野生型BMP2荧光素酶报告基因的荧光活力与突变型BMP2荧光素酶报告基因的荧光活力均无明显差异,无统计学意义（P＞0.05）;miR-NC组与miR-95-5p组相比较,miR-95-5p组ADSCs成骨诱导分化后ALP活力、ALP染色、茜素红染色A570nm水平、BMP2、Runx2、OCN表达水平均明显降低（均P＜0.05）;miR-95-5p靶向BMP2基因m RNA3’UTR第868?874碱基;与miR-NC组比较,miR-95-5p组ADSCs中野生型BMP2荧光素酶报告基因的荧光活力明显降低（P＜0.05）。结论:miR-95-5p对ADSCs的成骨分化具有抑制作用,靶向BMP2基因是可能的分子机制。
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