不同来源木质纤维素对桦褐孔菌液体深层发酵产多酚的影响

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桦褐孔菌Inonotus obliquus,是一种生长在寒带的白腐真菌,主要分布于北纬45-50°地区,包括俄罗斯、日本及中国的黑龙江省和吉林省等。十六世纪至今,桦褐孔菌一直作为民间药物,它具有显著的药理活性,对人体副作用非常小。近年来研究发现,桦褐孔菌中的抗氧化主要成分——桦褐孔菌多酚的抗氧化作用,优于D-VC钠和没食子酸丙酯等常用的抗氧化剂,桦褐孔菌多酚作为一种天然抗氧化剂,具有广阔的应用前景。然而天然的桦褐孔菌要生长10年以上才具有很高的药用价值,桦褐孔菌资源已经无法满足市场需求,因此我们采用液体深层发酵技术来制备桦褐孔菌多酚。本论文利用白腐真菌可以降解木质纤维素这一特性,以不同来源的木质纤维素(甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳)为桦褐孔菌液体深层发酵的后续碳源,制备高产量、高活性的的桦褐孔菌多酚类物质。本研究显示桦褐孔菌在有别于自然环境的液体深层发酵中能有效分解木质纤维素,在木质纤维素的降解过程中,胞内外多酚的产量和活性得到大幅提高,而且不同的木质纤维素对桦褐孔菌胞内胞外多酚产量、活性、组成的影响不同。实验结果表明:1.甘蔗渣和稻秆的主要成分是纤维素,含量分别是48.8%,39.6%;而麦秆和花生壳的主要成分是半纤维素,含量分别是38.0%,35.5%。桦褐孔菌对稻秆、麦秆、甘蔗渣、花生壳中木质素的降解率分别是74.8%,73.2%,58.5%,70.2%;对半纤维素的降解率分别是48.3%,71.6%,49.1%,67.6%;对纤维素的降解率分别是61.7%,48.9%,49.0%,66.2%。2.我们得出甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳都能促进桦褐孔菌生物量增加,促进率分别为45.7%,84.9%,54.9%,135.2%(p <0.05),花生壳的促进作用最显著。3.四种木质纤维素(甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳)对桦褐孔菌液体深层发酵产胞内外多酚的产量和抗氧化活性均有一定的促进作用。甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳的最大胞外酚产量分别是120.8mg GAE/L(216h),97.9mgGAE/L(48h),151.6mg GAE/L(192h),89.1mg GAE/L(240h),它们的促进率分别是106.9%,67.6%,151.2%,52.6%(p <0.05)。添加甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳的最大胞内酚产量分别是20.5mg GAE/g(96h),20.4mg GAE/g(216h),21.1mg GAE/g(264h),19.1mg GAE/g(96h),促进率分别是26.1%,38.9%,45.3%,31.7%(p <0.05)。4.添加甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳培养基的胞外酚和胞内酚的DPPH和OH自由基的清除率均高于无木质纤维素发酵产的胞内外多酚。甘蔗渣胞外酚DPPH清除率最高,为69.8%(216h),麦秆胞内酚OH清除率最高,为66.4%(72h),多酚的测定浓度是20μgGAE/mL。5.最佳木质纤维素是甘蔗渣和麦秆,甘蔗渣培养基的胞外酚中ECG、EGCG和phelligridin G的含量分别提高了208.9%,97.2%和18.6%。麦秆培养基胞内酚中的EGCG和ECG含量最高,分别为12.4%和14.8%。同时,不同来源的木质纤维素促进了Inoscavin B、Phelligridin G、davallialactone等成分的产生。
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