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目的： 1.初步建立应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)分析大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌引起的血流感染血清多肽指纹图谱，寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型。 2.建立临床常见五种革兰阴性菌血流感染ICR小鼠模型以及白色念珠菌血流感染ICR小鼠模型，为血流感染血清标志物的寻找奠定理论基础。 3.应用MALDI-TOF MS分析建立的血流感染模型血清多肽，寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型，同时应用纳米液相色谱-电喷雾电离-串联质谱对候选多肽氨基酸序列进行鉴定寻找新的标志物。 方法： 1.建立大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌ICR小鼠血流感染模型，收集不同感染时间段的血清标本，经弱阳离子交换磁珠纯化，MALDI-TOF MS检测及BioExplorer生物软件分析研究金葡菌感染组与正常对照组、大肠埃希菌感染组与正常对照组间血清多肽指纹图谱，寻找差异峰并建立相应的诊断模型。 2.建立常见的革兰阴性菌（大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和变形杆菌）、白色念珠菌血流感染小鼠模型。对获取的菌株进行平板分纯及LB液体培养基增菌培养，之后按Karber法计算各个细菌的LD50，之后在建立血流感染模型时均以1/2（LD50）浓度菌液感染小鼠。之后收集相应的血清标本，经弱阳离子交换磁珠纯化，MALDI-TOF MS检测及BioExplorer生物软件分析研究感染组与正常组、感染组之间的血清多肽指纹图谱，寻找差异峰并建立相应的诊断模型。 3.应用纳米液相色谱-电喷雾电离-串联质谱对候选多肽氨基酸序列进行鉴定寻找新的标志物。 结果： 1.比较金葡菌感染组与正常对照组发现表达上调的多肽有6个，表达下调的多肽有7个，表达呈先上调后下调的多肽有8个。组合m/z 5781.6、3921.7、5855.5、3869.2、1227.4五个峰建立多肽诊断指纹图谱模型，该模型在30例金葡菌感染组和30例正常对照组间的正确率分别为86.7%、80%。比较大肠杆菌感染组与正常对照组发现表达下调的多肽有5个，表达呈先下调后上调的多肽有4个，表达呈先上调后下调的多肽有8个。组合m/z 7506.1、7516.2、7816.7、2924.1、5007.3五个峰建立多肽诊断指纹图谱模型，该模型在大肠杆菌感染组和正常对照组间的正确率分别为90%、86.7%。 2.通过前期实验所得，肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和变形不动杆菌的LD50分别为1.11*109 CFU/ml、9.6*108 CFU/ml、1.5*108 CFU/ml、8.1*108 CFU/ml，白色念珠菌的LD50为6.6*108 CFU/ml。通过分别比较各感染组和正常对照组，发现肺克组、鲍曼组、铜绿组和变形组分别检测到104、127、115和103个多肽峰，其中差异多肽峰分别为50、99、62和77个；白色念珠菌检测到135个多肽峰，其中差异多肽峰为45个。 3.五种革兰阴性菌感染小鼠后，MALDI-TOF MS分析质谱图，发现在这五种细菌感染组中共同出现的多肽峰有33个，其中表达趋势均为感染组高于正常对照组的多肽峰有4个，分子量分别为m/z1001.7、1021.7、1230.2和1270.1；表达趋势均为感染组低于正常对照组的多肽峰有9个，分子量分别为m/z1513.8、1533.3、2951.3、3113.3、3497.3、5007.3、7506.1、7516.2和7816.7；其余多肽峰的变化趋势均不稳定，所以暂未列出。组合m/z 7506.1、7516.2、7816.7、2924.1、5007.3五个峰建立多肽诊断指纹图谱模型，该模型在大肠、肺克、鲍曼、铜绿和变形中的正确率分别为90%、86.7%、83%、85%和82.7%。 4.BioExplorer软件分析白色念珠菌感染组不同时间段多肽样本，其中发现有5个多肽峰随感染时间的延长呈上升趋势，有6个多肽峰随感染时间延长呈下降趋势，有7个多肽峰随感染时间延长呈现先上升后下降的趋势。组合m/z1610.9、1742.3、2666.4、2778、3345.1、4528.8这六个峰建立诊断模型，其模型区分30例白色念珠菌感染小鼠有24例正确分类，其正确率为80%。 5.对候选的差异多肽进行纳米液相色谱-电喷雾电离-串联质谱鉴定发现， m/z1513.8为ITIH4，m/z1533.8为SAA2，m/z1001.7、1646.8和5007.3共同鉴定为CO3，m/z1021.7和2794.3共同鉴定为KNG1。 结论： 1. 结果表明，MALDI-TOF MS检测及联合运用磁珠提取多肽技术，能够比较灵敏、简便地检测小鼠菌血症血清多肽表达情况，获得的质谱图包括了不同分子量多肽峰的数目、质荷比、丰度等全面信息，通过BioExplorer软件分析可以较清楚地发现不同组之间的图谱差异，以及能了解差异峰在各组间的强度变化情况，对于细菌性血流感染的早期诊断、病因分析，及之后寻找潜在的具有临床价值的新型生物标志物而言具有重要意义。 2.CO3、SAA2、ITIH4以及KNG1有望作为新的辅助诊断细菌性血流感染血清蛋白标志物，联合应用提高其诊断效率，为临床的合理用药提供相应的依据。