背景与目的：自然杀伤(naturalkillerCell,NK)细胞和树突状细胞(dendriticcells,DCs)在抗肿瘤免疫反应中发挥重要作用，NK细胞在体内无须抗原预先致敏即能杀伤肿瘤细胞，DCs是目前发现的体内最强的抗原提呈细胞(antigen-presentingcells,APC)，能够引发一系列抗肿瘤免疫应答。NK细胞和DCs可能影响肿瘤患者的预后，随着肿瘤免疫研究的深入，NK细胞和DCs在抗肿瘤中的地位越来越受到重视，两者在肺鳞癌组织中的浸润对患者预后的影响仍不清楚。本研究通过检测肺鳞癌组织中NK细胞和DCs浸润的密度、分布状况等指标，并对患者淋巴转移、术后生存时间等临床病理指标进行相关研究，旨在探讨肺鳞癌组织中浸润NK细胞和树突状细胞的密度与预后的关系。 材料与方法：全部病例来源于1998年1月至2001年9月间山东省平邑县人民医院胸外科手术切除的肺鳞癌患者，对影像检查等相关临床资料完整、术前无放疗、化疗史者进行随访，获取术后生存时间及死因等。下述情况应排除在外：1)手术切除后30天内死亡，2)死于与肺鳞状细胞癌无关的原因，3)肺鳞癌术前2周内有呼吸道感染病史。符合上述条件的病人共47例。其中男36例，女11例。年龄在49～75之间，平均62.6岁。根据国际抗癌联盟(UICC)1997年的TNM分期标准，其中Ⅰ期11例，Ⅱ期21例，Ⅲ期15例。有淋巴转移36例，无淋巴节转移11例。根据肿瘤侵润深度分为T1期6例，T2期30例，T3期11例。其中肺叶切除术41例，左侧全肺切除术6例。其中有淋巴结转移36例，无淋巴结转移11例。术后生存时间8月～5年以上。根据术后生存期的差异，将本组病例分为短期生存组(术后生存期＜36月)20例，长期生存组27例(术后生存期≥36月)。 采用SP法，将全组病例癌组织蜡块进行切片，厚度4μm，NK细胞用CD57抗体标记、DCs用S-100蛋白标记进行免疫组化染色，所有操作步骤均按试剂盒说明进行。由病理科医生双盲阅片，对每张切片随机计数10个含有阳性细胞的高倍视野(×400)，分别计数阳性细胞数，取其平均值。 采用SPSS12.0统计学软件对结果进行统计学分析。对长期生存组、短期生存组之间每高倍视野NK细胞、DCs均数的比较，以及各病理参数分组的细胞均数的比较采用t检验，生存率的计算和生存曲线的绘制采用Kaplan-Meier方法，以Logrank检验比较两组生存差异的显著性。 结果： 1长期生存组与短期生存组之间NK细胞、DCs每高倍视野细胞均数的比较免疫组化染色结果显示CD57阳性的NK细胞染色主要定位于胞膜和胞核，呈棕黄色，与其他浸润的淋巴细胞一起分布在癌巢周围及肿瘤的间质中。孤立的NK细胞，有时也会出现在距离肿瘤细胞很近的地方。在本组47例肺鳞癌组织中，CD57阳性的NK细胞每高倍野细胞浸润数为0.4～46.3/HPF，平均17.2±13.9/HPF。长期生存组中NK细胞浸润平均数为23.3±12.2/HPF，明显高于短期生存组平均数9.0±11.9/HPF，P＜0.05。S-100阳性的DCs，细胞浆和细胞核均有阳性着色，细胞形态不规则，胞浆可见长短不一、数目不等的树突状突起。在肺鳞癌组织中，S-100阳性的DCs多数呈区域性分布在间质和癌巢周围，常和淋巴细胞相伴浸润。47例肺鳞癌组织中，每高倍视野浸润的DCs数为1.2～17.8，平均为5.6±3.5。长期生存组和短期生存组DCs浸润数分别为7.6±3.3/HPF和2.9±1.2/HPF，两组差异有显著性，P＜0.05。 2肺鳞癌组织中NK细胞和DCs的浸润与临床病理特征的关系 NK细胞与DCs在肺鳞癌组织中的浸润与患者的年龄及性别等因素无关。但是两者均与患者的临床分期、肿瘤的侵润程度及淋巴结有无转移等因素有关。无淋巴结转移组的NK细胞与DCs浸润数明显高于有淋巴节转移组，两组差异有显著性(P＜0.05)，NK细胞与DCs在Ⅰ期肺鳞癌组织中的细胞浸润数高于Ⅱ、Ⅲ期中的细胞数，两者差异有显著性(P＜0.05)，但它们在Ⅱ、Ⅲ期中的细胞数虽然有差别，但两者差异无显著性(P＞0.05)。与上述结果类似，NK细胞与DCs浸润结果在T1期中的数量高于T2及T3组，差异有显著性，随着肿瘤侵润程度的加深，两者的浸润数量逐渐减少，但在T2及T3组之间差异无显著性(P＞0.05)。 3肺鳞癌组织中NK细胞和DC的浸润与患者预后的关系 将每高倍视野下浸润的NK细胞数分为高低浸润两组，NK细胞浸润≥25个/HPF为高浸润组，共13例；将NK细胞浸润数＜25个/HPF为低浸润组共34例。同样将DCs浸润也分为高低浸润两组，DCs浸润≥6/HPF为高浸润组，共19例；DCs浸润＜6/HPF为低浸润组，共28例。高浸润的NKC和DCs组中，术后平均生存分别为45.3月和50.5月，显著高于低浸润的NKC和DC，分别为31.9和25.6月(P＜0.05，P＜0.01)。进一步比较NK细胞及DCs与术后生存时间的关系，将本组病人依据NK细胞及DCs的浸润情况的不同分为如下4组：NK细胞和DCs均为高浸润的HH组，NK细胞及DCs分别为高、低浸润的HL组，NK细胞及DCs分别为低、高浸润的LH组，NK细胞及DCs分别为低、低浸润的LL组。其中HH组9例(50.7±10.7)，HL组4例(33.0±15.7)，LH组10例(50.2±8.3)，LL组24例(24.3±13.4)。对上述4组结果比较，发现LL组术后生存时间显著短于上述3组，P＜0.05。将TNM分期、淋巴结转移、病人年龄、性别及NK细胞和DCs的浸润纳入Cox多因素风险比例模型，发现TNM分期、淋巴结转移为影响预后的独立因素，NK细胞和DCs的浸润虽然与预后相关，但不能成为影响预后的独立因素。 结论： 在肺鳞癌中，NK细胞和DCs在肿瘤组织中的浸润数量与肿瘤患者的预后呈正相关，可作为判断肺鳞癌预后的指标之一，两者联合检测意义较大，但两者不是影响预后的独立因素。