背景及目的骨质疏松（Osteoprosis,OP）是临床常见的全身骨系统疾病,其特点是持续性的骨量减少,骨组织内部广泛微结构破坏,对全身骨骼影响巨大。OP的发生与发展十分复杂,涉及到遗传,环境,营养,内分泌等多个方面。颌面部骨作为全身骨系统的一部分,其健康也深受OP的影响。临床上常观察到OP患者的牙槽骨高度或有降低,骨质显著下降,甚至直接影响患者口内余留牙的数量及种植体骨结合的质量。此外牙周组织及颞下颌关节的健康也与全身OP有着密切联系。在我国“健康中国2030”规划纲要中明确提出开展“健康口腔,健康骨骼”专项行动,也倡导我们将口腔健康与全身骨骼健康更加紧密的联系起来,为健康中国贡献力量。植物激素在我国传统医药体系中占据重要地位,近几年,对于植物激素的研究主要集中在抗氧化,抗癌、抗炎、治疗糖尿病等方向,例如通过抑制COX-2相关酶来预防和治疗新冠病毒引起的肾损伤,通过肝细胞GPER1受体抑制肝癌的发生与发展。芒柄花黄素（Formononetin,FMN）作为植物雌激素的一种,最初来源于红车轴草,常富集于黄芪,甘草等植物的根茎组织内部,是我国传统医药体系的常用药物。作为天然来源的异黄酮类物质,其分子结构上有一个效能官能团:甲氧基。相较于其他双甲氧基甚至三甲氧基类的植物雌激素,芒柄花黄素的类雌激素效果相对较弱,但其毒副作用更小,药效温和持久,是一种非常稳定的植物雌激素。此外,芒柄花黄素的结构更加趋向于二维,比其他三维结构的植物雌激素更易吸收利用。加上其生产与保存容易,本研究选择芒柄花黄素作为实验药物。目前,对OP的预防和治疗主要通过抑制破骨细胞的增殖与分化以及补充钙离子,减缓钙质流失两种途径。直接作用于成骨细胞的治疗方式或药物不多。临床上寻找一种可以增加成骨细胞活性并促进其分化成骨的药物,成为当下的热点方向。芒柄花黄素作为植物激素,其对破骨细胞的抑制效应先前已有充分研究。但是对成骨细胞的影响有待深入论证。本实验用芒柄花黄素对前成骨细胞进行干预,探讨其对前成骨细胞增殖及分化的影响。并初步探究其作用机制和相关通路,希望为缓解或治疗骨质疏松症提供一个新思路。方法1)芒柄花黄素（FMN）干预小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1细胞系）体外培养,观察其增殖情况。2)CCK-8法检测芒柄花黄素对MC3T3-E1细胞系增殖活动的影响。3)碱性磷酸酶（ALP）染色法检测MC3T3-E1细胞系的成骨分化活动。4)茜素红S染色法检测MC3T3-E1细胞系的钙化情况。5)芒柄花黄素干预下,MC3T3-E1细胞系碱性磷酸酶（ALP）表达量的测定。6)MC3T3-E1细胞系总RNA的提取,Real-time PCR检测Wnt/β-catenin通路及成骨分化相关基因的m RNA表达。7)MC3T3-E1细胞系总蛋白的提取,Western-Blot法检测Wnt/β-catenin通路与成骨分化相关蛋白的表达。结果1)芒柄花黄素（FMN）干预下,小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1细胞系）生长情况良好,形态稳定,细胞正常。2)CCK-8法检测结果表明,培养第五天时,和对照组相比,当FMN终浓度在1×10-6 mol/L时,小鼠MC3T3-E1细胞的增殖活力最强。3)茜素红-S染色结果表明,与对照组相比,1×10-6 mol/L浓度FMN干预的MC3T3-E1细胞钙化情况较好,矿化结节形成明显。4)碱性磷酸酶（ALP）染色及表达量测定结果表明,与对照组相比,FMN浓度在1×10-6 mol/L时,MC3T3-E1细胞的ALP表达活跃。第七天ALP的表达量提高（P＜0.05）,第十四天ALP表达量明显提高（P＜0.01）。5)Real-time PCR及Western-Blot结果显示,FMN浓度在1×10-6 mol/L时,MC3T3-E1细胞Wnt/β-catenin通路及成骨分化相关m RNA表达量明显升高（P＜0.05）,相关蛋白表达量明显升高（P＜0.05）。结论体外环境培养下,10-6mol/L的芒柄花黄素（FMN）可以促进小鼠MC3T3-E1细胞的增殖,并通过上调Wnt/β-catenin通路,促进MC3T3-E1细胞成骨分化。