论文部分内容阅读
目的：通过构建大鼠周围神经损伤模型,比较感觉和运动神经束Wallerian变性前后差异表达蛋白,筛选感觉和运动神经束特异表达蛋白为周围神经趋化性再生机制的研究提供依据。方法：选择成年雄性8周龄Wistar大鼠60只,分成3组,其中A、B两组分别行股神经横断模型(n=20)和神经根损伤模型(n=20)的建立,C组作为神经根损伤模型的正常对照组(n=20),股神经横断模型选择对侧正常神经作为对照。7d后各组分别进行取材,并应用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation,同位素标记相对和绝对定量技术)联合LC-MS/MS (liquid chromatography-tandem mass spectrometry,液相色谱-串联质谱)对各组样本提取的蛋白进行同位素标记、质谱分析及差异蛋白的鉴定,应用DAVID (DAVID Bioinformatics Resources)对所鉴定出的差异蛋白进行GO(Gene ontology)功能和KEGG Pathway通路的富集,比较Wallerian变性后感觉和运动神经的差异表达蛋白,筛选与周围神经趋化性再生机制相关的蛋白。结果：(1)在股神经损伤模型中,共鉴定出3358个差异表达蛋白,其中股神经肌支Wallerian变性前后共鉴定出293个差异蛋白,隐神经变性前后共鉴定出417个差异蛋白,通过交集分析,肌支变性前后特异的差异蛋白有107个,隐神经变性前后特异的差异蛋白有231个。(2)在神经根损伤模型中,共鉴定出4312个差异表达蛋白,腹侧神经根变性前后共鉴定出637个差异蛋白,背侧神经根变性前后共鉴定出626个差异蛋白,通过交集分析,腹侧神经根变性前后特异的差异蛋白有195个,背侧神经根变性前后特异的差异蛋白有184个。结论：应用iTRAQ技术检测大鼠感觉和运动神经纤维变性前后表达差异蛋白,筛选感觉和运动神经变性后特异表达的蛋白,为周围神经趋化性再生的机制研究提供了依据。