O-连接-N-乙酰葡糖胺（O-GlcNAc）修饰是一种蛋白质的翻译后修饰（PTM）,广泛存在于哺乳动物细胞质和细胞核中。不同于细胞膜上的复杂聚糖修饰,O-GlcNAc修饰是发生在细胞内可溶蛋白的丝/苏氨酸残基上的可逆单糖修饰。O-GlcNAc修饰与蛋白质磷酸化修饰类似,是动态变化的过程,该过程是指糖基供体UDP-GlcNAc在O连接N乙酰葡糖胺转移酶（OGT）的催化作用下连接到蛋白质裸露的丝/苏氨酸的残基上,完成O-GlcNAc修饰;而在对应糖苷酶（OGA）的作用下,将O-GlcNAc从蛋白质肽链上水解,完成去糖基化。因此,开发可调控胞内O-GlcNAc修饰水平的小分子抑制剂将有助于进一步研究O-GlcNAc修饰的生理功能。在已报道的O-GlcNAc小分子抑制剂中,本课题组前期开发的天然产物类L01显示出较低的IC₅₀值,具有细胞毒性小的优势。在此基础上,本研究在其结构类似物中,进一步筛选得到具有更好OGT抑制活性的3,8’-联芹菜苷元。将10种L01天然产物类似物与OGT进行分子对接和结合能分析,在无细胞反应体系中比较这些化合物的OGT抑制活性。比较分析得出3,8’-联芹菜苷元具有优于L01的OGT抑制活性。分子动力学模拟结果显示,3,8’-联芹菜苷元与OGT底物结合口袋附近的Phe 837、Gln 839、Ala 896、His 920、Thr 922形成较稳定的氢键相互作用。进一步对该分子进行细胞内活性检测,利用Western blot法得出3,8’-联芹菜苷元能以时间和浓度梯度方式抑制OGT活性,进而降低人宫颈癌Hela细胞的O-GlcNAc修饰。采用细胞划痕和Transwell法观察3,8’-联芹菜苷元对Hela细胞迁移侵袭潜能的影响。结果表明3,8’-联芹菜苷元具有优于L01的肿瘤细胞转移抑制活性。通过在线预测与外源表达等手段,本文证明了细胞内的拓扑异构酶Ⅱα（TOP2A）蛋白具有O-GlcNAc修饰,使用3,8’-联芹菜苷元处理过表达TOP2A的293T细胞,发现其具有抑制TOP2A的O-GlcNAc修饰作用。本文的研究结果证明,3,8’-联芹菜苷元具有细胞外和细胞内抑制蛋白质O-GlcNAc修饰的作用,进而阻止肿瘤细胞的迁移侵袭。这些结果可为O-GlcNAc小分子抑制剂和O-GlcNAc修饰功能的研究提供参考,为治疗肿瘤转移相关研究提供相关工具。