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目的：为了规范针灸治疗,客观、科学地评定疗效,拟利用中医基础理论,结合现代医学的研究方法,利用缺血缺氧脑损伤的新生动物模型、利用分子生物学、免疫学技术观察不同针刺时间下的大脑神经干细胞的增殖、分化情况,探讨针刺治疗新生儿缺血缺氧脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的机制,明确针刺治疗本病的最佳的时效。为针刺治疗HIE提供科学、扎实的理论依据,为HIE的综合治疗寻找更适合小儿特点的安全、实用的有效方法。材料与方法：健康新生7天SD大鼠雌雄不拘,体重12g-14g,,随机分为正常(空白)对照组24只、模型组24只、快速刺不留针组(速刺)24只、留针30min组24只,后三组结扎左侧颈总动脉并缺氧2小时制作新生儿鼠缺血缺氧性脑病模型。每组又分为3天组、7天组、14天组和28天组,分别于术后第3天、第7天、第14天和第28天进行取材；四组同时于各观察点取材。四组的喂养条件相同。针刺方法：选任脉、督脉穴位,分别给与快速刺不留针、留针30min,每天一次。正常对照组和模型对照组不做针刺处理。各组动物取材前2小时腹腔注射Brdu (5—溴脱氧尿嘧啶核苷)用于标记脑内神经干细胞增殖情况。分别于模型建立后3d、7d、14d和28d后,运用神经功能缺损评分和HE染色观察动物的神经功能症状与脑损伤病理改变;免疫组化观察大鼠缺血缺氧侧海马齿状回(DG)、室管膜下区(SVZ)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),巢蛋白(Nestin)的改变,检测脑缺血缺氧后神经干细胞的数量及其增殖,从而评价速刺、留针对脑缺血缺氧损伤后神经干细胞的影响作用。结果：1、速刺、留针对HIE大鼠神经功能缺损评分的影响：经Kruskal-Walhs检验(正常对照组不计其中),各个手术组大鼠术后28天的神经功能症状较第1天明显减轻(P<0.01)。在各组之间的两两比较中,速刺组和留针组大鼠的神经功能症状在术后14、17、21、28天比模型组明显减轻,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。2、速刺和留针对HIE大鼠脑组织形态结构的影响：模型对照组：左脑海马可见局灶状坏死,坏死区域胞核缩小呈凝固状,坏死灶周围正常组织结构层次清晰；左脑枕叶皮层可见大片组织结构模糊的坏死区域；速刺治疗组：大部分脑神经细胞变性,少量脑神经细胞变性坏死；留针治疗组：大部分脑神经细胞尚好,少量脑神经细胞变性坏死,3、速刺和留针对HIE模型大鼠脑组织BrdU蛋白表达的影响：与正常对照组比较,模型对照组大鼠大脑DG和SVZ区BrdU蛋白的表达显著增加(P<0.01)；速刺和留针均可使BrdU蛋白的表达上调。与模型对照组比较,速刺治疗组和留针治疗组BrdU蛋白的表达增加(P<0.01),具有统计学意义。速刺治疗组和留针治疗组比较,术后3d、7d时BrdU蛋白的表达无显著差异(P>0.05),术后14d、28dBrdU蛋白的表达具有显著性差异(P<0.05),留针治疗组表达高于速刺治疗组。4、速刺和留针对HIE模型大鼠脑组织Nestin蛋白表达的影响：与正常对照组相比较,模型对照组大鼠大脑DG和SVZ区Nestin蛋白的表达显著增加(P<0.01)；与模型对照组比较,速刺治疗组和留针治疗组Nestin蛋白的表达增加(P<0.01),具有统计学意义。速刺治疗组和留针治疗组比较,术后3d、7d时Nestin蛋白的表达无显著差异(P>0.05),术后14d.28dNestin蛋白的表达具有显著性差异(P<0.05),留针治疗组表达高于速刺治疗组。结论：1、速刺和留针刺能够促进HIE大鼠肢体功能康复,神经功能缺损评分有明显改善。2、速刺和留针刺能使HIE大鼠DG区和SVZ区BrdU阳性胞增殖更明显,表明速刺和留针刺使这两个区域增殖活性增加。3、速刺和留针刺能使HIE大鼠DG区和SVZ区Nestin阳性胞增殖更明显,表明速刺和留针刺促进神经干细胞的增殖。4、速刺和留针刺对HIE大鼠DG区和SVz区神经干细胞的影响早期无差别；第14d及第28d时留针刺组优于速刺组。5、本实验结果显示,速刺和留针刺能促进脑缺血缺氧后神经干细胞的增殖、分化,促进神经细胞修复,减轻功能缺损程度,这可能是针灸治疗HIE的重要作用机制之一。