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葫芦素B具有抗肿瘤、抗肝损害、抗化学致癌、增强机体免疫力等多种生物活性,目前临床用于慢性肝炎和原发性肝癌的辅助治疗。葫芦素B的生产方法主要是从中药甜瓜蒂中提取,但是产率较低。甜瓜蒂中也含有葫芦素B葡萄糖昔,其含量几乎接近于葫芦素B。对于糖苷键连接的化合物,由于人体缺乏相应的酶,不能将其水解为苷元而吸收利用,因此葫芦素B葡萄糖苷未能作为药物成分加以利用。微生物有着非常强大的酶系和分解转化能力,通过微生物生长代谢所产的酶将葫芦素B葡萄糖苷转化为葫芦素B,可以提高甜瓜蒂提取药用成分的利用率,且具有反应条件温和,专一性强、环境友好等优点。本文首次采用微生物酶法生物转化来自甜瓜蒂中的葫芦素B葡萄糖苷,得到葫芦素B,并对其转化工艺进行了优化研究,提高产率。首先,从土壤和污水样品中分离纯化得到45株霉菌和放线菌菌株,以这些菌株发酵所得的粗酶液为催化剂,生物转化处理从甜瓜蒂中提取的含葫芦素B葡萄糖苷的粗提物,比较不同菌株产酶对葫芦素B葡萄糖苷的转化能力,筛选出一株能将葫芦素B葡萄糖苷转化为葫芦素B的活性菌株RW-2。根据形态学、16S rDNA核酸序列和系统发育分析,确定该菌株为链霉菌(Streptomyces sp.)。其次,以葫芦素B摩尔产率为指标,通过单因素实验和响应面分析,从发酵产酶条件和转化条件两方面,对链霉菌RW-2生物转化葫芦素B葡萄糖苷的工艺进行了优化,确定最佳工艺为：产酶培养基组成：土豆200g/L,蔗糖30g/L,大豆粉15g/L；培养基初始pH7.2；培养温度28℃,振荡转速180r/min,培养时间4d；转化条件为：8mL经2倍稀释的粗酶液、1mL底物溶液和1mL500mM的MnSO4溶液组成10mL的转化体系,在温度32℃、振荡转速180r/min的条件下转化16h。此条件下葫芦素B摩尔产率达到了99.5%,较优化前的17.2%提高了82.3%,总葫芦素中葫芦素B的浓度从1.80g/L提高到3.23g/L,提高了79.4%。最后,采用MCI CHP20P柱色谱分离纯化葫芦素B,用乙醇-水梯度洗脱,洗脱曲线表明葫芦素B主要集中在60%乙醇的洗脱液中,收集此段洗脱液,浓缩干燥后即得产物葫芦素B,收率78.5%,纯度98.4%。并通过LC-MS,1H-NMR鉴定产物结构,证实分离产物为葫芦素B。