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目的:建立大鼠实验性牙周炎引起的感染性心内膜炎模型,探讨粪肠球菌心内膜炎抗原(Efa A)在大鼠牙周炎及相关感染性心内膜炎中的作用,为临床上预防和治疗慢性牙周炎和感染性心内膜炎奠定基础。方法:1、牙周炎-感染性心内膜炎模型的建立及评价:(1)以牙龈划割—钢丝结扎—牙周炎患者细菌培养物冲洗—正常饮食法复制大鼠牙周炎模型。左侧上頜第二磨牙做实验性牙周炎模型,右侧做自身对照。钢丝结扎后24小时,将过夜培养的重度牙周炎患者细菌培养物和粪肠球菌菌液0.5ml对实验大鼠口腔进行冲洗。4周后腹腔麻醉处死大鼠,取上頜第二磨牙牙体组织进行牙周炎检测;(2)将PE-50导管从大鼠右侧颈总动脉插入,皮下固定,缝和切口,消毒后放回笼中正常饲养,制备由导管造成心脏瓣膜损伤大鼠;(3)观测左侧上頜第二磨牙牙周炎的形成:牙周袋的形成及釉牙骨质界(CEJ)到牙槽嵴的距离;(4)观察大鼠心内膜炎感染情况:解剖大鼠剥离心脏,取出心脏瓣膜赘生物,称取赘生物湿重,匀浆细菌计数;综合评价牙周炎-感染性心内膜炎模型是否建立成功。2、粪肠球菌efa A-野生株和efa A+转化株大鼠牙周炎的比较对大鼠进行分组(每组6只),钢丝结扎后24小时,将过夜培养的重度牙周炎患者细菌培养物和粪肠球菌efa A-野生株、粪肠球菌efa A+转化株菌液0.5ml对实验大鼠口腔进行冲洗。4周后腹腔麻醉处死大鼠,取上頜第二磨牙牙体组织,比较2组大鼠牙周组织HE染色、牙体组织中C反应蛋白(CRP)免疫组化情况。3、粪肠球菌efa A-野生株和efa A+转化株大鼠牙周炎相关感染性心内膜炎的比较导管插入成功后24小时,将过夜培养的粪肠球菌efa A-野生株、粪肠球菌efa A+转化株菌液0.5ml对实验大鼠口腔进行冲洗,一周后腹腔麻醉处死大鼠,心脏取血,4000转/分离心10分钟,血清收集完毕后酶联免疫吸附法检测C反应蛋白(CRP)的水平;解剖大鼠剥离心脏,取出心脏瓣膜赘生物,比较2组大鼠的赘生物湿重及匀浆后细菌计数情况。结果:1、牙周炎-感染性心内膜炎模型的建立成功建立牙周炎-心内膜炎大鼠模型:左侧牙周组织在牙龈划割后2天就出现了0.5mm牙周袋深度,到第四周末(心脏插管)时牙周袋深度已达到3.0mm,实验牙牙槽骨呈现凹坑状吸收,甚至已深达根尖;处死并解剖大鼠,心脏瓣膜可见赘生物形成,赘生物平均重量为19.27mg,平均菌落计数为2.01×1010CFU/mg。2、粪肠球菌efa A-野生株和efa A+转化株大鼠牙周炎的比较牙周炎大鼠的牙周组织出现牙周袋。Efa A-野生株:结合上皮向根方移动,上皮固有层炎性细胞浸润,牙槽骨吸收;Efa A+转化株:炎症反应更为显著,显示大量结合上皮向根方移动,棘层增生、上皮钉突伸长更明显,牙槽骨破坏显著。免疫组化染色CRP在大鼠牙周炎模型中,Efa A-野生株,CRP在成骨细胞中不表达,仅在部分成纤维细胞中呈弱阳性表达;Efa A+转化株,CRP在成纤维细胞及成骨细胞中均有表达。3、粪肠球菌efa A-野生株和efa A+转化株大鼠牙周炎相关感染性心内膜炎的比较Efa A+转化株引起的牙周炎相关感染性心内膜炎,赘生物湿重平均值为19.27mg,细菌计数为2.01×1010CFU/mg,血清中CRP水平为4.69 ng/ml;Efa A-野生株引起的牙周炎相关感染性心内膜炎,赘生物湿重平均值为8.03mg,细菌计数为0.48×1010CFU/mg,血清中CRP为2.21ng/ml。转化株与野生株比较赘生物湿重值、细菌计数均较高(P<0.01),血清中CRP较多(P<0.05)。结论:1、成功建立了慢性牙周炎相关感染性心内膜炎大鼠模型。2、肠球菌心内膜炎抗原Efa A有利于大鼠牙周炎及相关感染性心内膜炎中的发生与发展