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目的：制备人卵巢癌细胞系HO-8910细胞的冻融物、弱酸洗脱肽和总RNA，用于负载脐血树突状细胞(dendritic cells DCs)，观察负载肿瘤抗原的DCs体外激活异体混合T淋巴细胞效应和激活的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte CTL)对卵巢癌细胞的杀伤效应。寻找最佳的脐血树突状细胞负载抗原方式，激发高效的抗卵巢癌免疫反应，为进一步的动物实验和临床试验奠定基础，从而为卵巢癌的生物治疗提供新的思路。 材料和方法：采集健康足月妊娠孕妇的脐带血，以淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cell CBMNC)，将其中贴壁细胞在细胞因子rhGM-CSF2000u／ml、rhIL-4 500u／ml及rhTNF-α100u／ml的配伍作用下诱导分化为DCs。反复冻融法制备人卵巢癌细胞系HO-8910肿瘤细胞的冻融物，PH为3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液洗脱肿瘤细胞表面与MHC-Ⅰ类分子结合的抗原肽以及超绝UNIQ-10柱总RNA抽提试剂盒抽提肿瘤细胞总RNA，用其作为卵巢癌抗原负载DCs。~3H-TdR掺入法测定三种形式肿瘤抗原负载的DCs对异体外周血混合T淋巴细胞的体外活化效应。MTT法检测活化的CTL对人卵巢癌细胞系HO-8910肿瘤细胞的杀伤作用。 结果：贴壁的CBMNC在细胞因子rhGM-CSF2000u／ml、rhIL-4 500u／ml及rhTNF-α100u／ml的配伍作用下体外诱导分化为具有典型形态和表型的DCs。上述三种方法成功得到人卵巢癌冻融物、弱酸洗脱肽和总RNA，用其负载的DCs与异体混合T淋巴细胞体外共培养后，T细胞增殖加快，成功地诱导出肿瘤特异性CTL。在效靶比为1∶10、1∶50和1∶100时，负载肿瘤抗原的DCs组均较未负载组刺激指数高。在10∶1、50∶1和100∶1三种不同效靶比的杀伤实验中，负载肿瘤抗原DCs活化的CTL均较未负载肿瘤抗原和未激活组杀伤率高，弱酸洗脱肽和总RNA组较冻融物组杀伤能力强，而弱酸洗脱肽和总RNA组比较无显著差异。且随着效靶比的增高，杀伤率增大。而负载卵巢癌抗原DCs激活的CTL对人鼻咽癌CNE细胞无明显的杀伤作用。 结论：CBMNC可以在GM-CSF、IL-4和TNF-α的作用下体外诱导分化为功三种形式肿瘤抗原负载的脐血树突状细胞体外诱导抗卵巢癌免疫反应中文提要能性DCs。反复冻融法，PH为3.3的构椽酸一磷酸盐缓冲液洗脱法以及超绝UNIQ一10柱总RN.A抽提试剂盒可得到卵巢癌细胞的冻融物、弱酸洗脱肤和总RNA，用其负载脐血DCS，在体外均可激活CTL，有效地诱导特异性抗卵巢癌免疫反应。