【摘 要】
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单克隆抗体技术(monoclonal antibody technique)又称杂交瘤技术,是20世纪70至80年代诞生的生物高新技术。它是使免疫动物的脾细胞在聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)的诱
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单克隆抗体技术(monoclonal antibody technique)又称杂交瘤技术,是20世纪70至80年代诞生的生物高新技术。它是使免疫动物的脾细胞在聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)的诱导下与同系动物的骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞,这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特性,又具有B细胞分泌特异性抗体能力。本研究采用单克隆抗体技术,应用纯化的猪瘟病毒石门毒株(Classical Swine Fever Virus SM, CSFV-SM )免疫试验猪,利用猪脾脏细胞和小鼠浆细胞瘤细胞NS0进行异源细胞融合,经筛选和克隆后,获得了4株能分泌抗CSFV的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1B9、1D4、3G11、5B6。应用间接ELISA测定杂交瘤细胞培养上清效价,杂交瘤细胞株1B9和1D4细胞培养上清效价都是1:20,杂交瘤细胞株3G11和5B6细胞培养上清效价都是1:80。间接ELISA试验结果表明,4株单抗均与猪瘟石门株PK-15细胞毒抗原反应,说明它们识别CSFV。本试验建立的分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体异源杂交瘤细胞株,为进一步研究猪瘟病毒的免疫机制及生物学特性和开发敏感、特异、快速诊断猪瘟疫病的试剂盒奠定了基础。
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