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糖尿病(Diabetes mellitus，DM)是一种由胰岛素分泌不足或利用缺陷导致的慢性疾病。由其引起的长期高血糖会破坏多个组织器官的功能，导致一系列并发症的发生，严重时可致残致死。据2017年数据统计，全球共有4.25亿成年人患有糖尿病，且仅2017年就有400万人因糖尿病死亡。因此，抗糖尿病药物的研发工作刻不容缓。 根据发病机理的不同，糖尿病主要分为1型糖尿病，2型糖尿病(Type2diabetes mellitus，T2DM)和妊娠糖尿病，其中T2DM患者占到患病总人数的90％。T2DM主要表现为胰岛β细胞功能受损导致的胰岛素分泌相对不足，及胰岛素靶器官的胰岛素抵抗。肝脏作为胰岛素靶器官之一，在机体的糖稳态调节中具有重要的作用，由肝脏输出的葡萄糖占内源生成葡萄糖的90％。T2DM病人的肝糖输出是健康人的两倍，且胰岛素抑制糖异生的作用减弱，显示出肝脏的胰岛素抵抗。由于肝糖输出的增加是导致高血糖的重要原因，因此抑制肝糖异生、减少肝糖输出可以改善T2DM症状。在目前的T2DM治疗药物中，具有靶向肝糖异生效果的主要有二甲双胍和噻唑烷二酮类药物。其中二甲双胍抑制糖异生的具体靶点不明确，限制了对其进行进一步改造利用，而噻唑烷二酮类药物由于毒副作用较大，已经被一些国家禁止销售。因此针对新靶点，开发安全有效的糖异生抑制剂将对抗T2DM药物的开发具有重要的指导意义。 本论文基于肝糖异生抑制的策略，先后发现了三个糖异生小分子抑制剂:HS218、FX5及地氯雷他定。我们充分评价了这三个化合物的糖异生抑制效果，并对其抑制糖异生的机制进行了探究，为新型糖异生抑制剂的开发奠定了基础。 在本论文的第一部分中，我们针对法尼醇X受体(FarnesoidXreceptor，FXR)为靶点，开发了其小分子抑制剂HS218(N-benzyl-N-(3-(tert-butyl)-4-hydroxyphenyl)-2，4-dichlorobenzamide），并在小鼠原代肝细胞中证明了HS218可通过拮抗FXR抑制糖异生。进一步，我们发现HS218可改善两种T2DM模型小鼠（db/db小鼠和HFD/STZ小鼠）的血糖平衡。由于HS218具有良好的糖异生抑制效果及特异性拮抗FXR的作用，我们利用HS218作为探针分子，对FXR调控糖异生的机制进行了深入探究。首次发现HS218可拮抗FXR与过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子（Peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator1-a，PGC-1a)启动子的结合，进而抑制PGC-1α的活性，并降低其下游糖异生相关调控因子，氧化物酶体增殖物激活受体α（Peroxisome proliferator-activated receptorα，PPARα）的转录。HS218对PPARa的抑制还可进一步激活蛋白激酶B(Protein kinase B，AKT)-Forkhead box protein O1(FoxO1)通路，以达到改善肝糖代谢的目的。该项研究为靶向FXR开发新型肝糖异生抑制剂提供了重要思路，同时为2型糖尿病病理机制的进一步阐明提供了重要素材。 在本论文的第二部分中，我们以糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor，GR)为靶标，开发了具有抑制GR活性且可降低肝糖异生的活性小分子FX5(5-chloro-N-[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]thiophene-2-sulfonamide)。我们发现FX5不仅可抑制胰高血糖素引起的糖异生，还可抑制地塞米松刺激的糖异生。因此我们对FX5抑制糖异生的机制进行了探究，发现FX5可特异性抑制GR下游的糖异生相关因子的表达，如肝细胞核因子4α(Hepatocyte nuclear factor4a，HNF4a)、葡萄糖-6-磷酸酶（Glucose-6-phosphate，G6Pase）和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK)。进一步我们利用db/db小鼠评价了FX5的降血糖效果，发现FX5可明显抑制db/db小鼠的肝糖异生，并改善血糖平衡。FX5的发现证明了靶向抑制GR开发降血糖药物的方向是可行的。 在本论文的第三部分中，我们利用糖异生抑制剂筛选平台，发现了具有糖异生抑制效果的老药地氯雷他定(Desloratadine，DLT)，并对其作用机制进行了初步的探究。发现DLT可通过激活肝细胞中的AKT-FoxO1通路对糖异生进行调节，但DUT调控AKT的作用不依赖于胰岛素受体，且DLT不会增加肝细胞中脂质的生成。说明了DLT有望作为一种新型胰岛素增敏剂用来治疗T2DM。 综上所述，本论文发现了具有糖异生抑制作用的FXR拮抗剂HS218，GR拮抗剂FX5及老药DLT。通过对这些化合物作用机制的研究，我们完善了糖异生的调控机制，并为基于糖异生抑制策略开发治疗T2DM药物提供了新的结构和研发思路。